1、目的:骨肉瘤是一種臨床常見的好發(fā)于青少年的成骨性惡性腫瘤，它惡性程度高，預后比較差。隨著化學療法、手術技術、骨重建等方法的進展，5年總生存率明顯提高。阿霉素(adriamycin，ADM)、順鉑(diamminedichloroplantinum，DDP)是抗骨肉瘤的最有效藥物，但腫瘤細胞對化療藥物產生耐藥性是影響化療療效的主要原因。許多化療藥物通過誘導凋亡抗腫瘤生長。XIAP是凋亡調節(jié)因子家族中對凋亡調節(jié)作用最強的分子之一，同時是唯一

2、的caspases抑制劑。研究顯示它在多種惡性腫瘤中上調表達，并與腫瘤化療耐藥及預后差緊密相關。RNAi是近年來發(fā)展起來的新技術，siRNA已經成為繼反義核酸、核酶之后基因治療的又一新武器。為此，我們合成特異性干擾XIAP基因的siRNA，并在脂質體介導下轉染骨肉瘤MG-63細胞，觀察其對骨肉瘤細胞生長抑制以及細胞侵襲性的影響，以及對骨肉瘤MG-63細胞ADM藥物敏感性及耐藥性的影響，從而為新的骨肉瘤的治療方法提供實驗依據。
　　

3、方法:
　　1根據XIAP基因已知序列化學合成1條含21-23個堿基的siRNA(XIAP-siRNA)及陰性對照(siRNA-neg);用化學合成的XIAP-siRNA轉染骨肉瘤MG-63細胞，通過RT-PCR方法和流式細胞術檢測轉染前后MG-63細胞XIAP-mRNA和蛋白水平的表達情況，進一步觀察轉染前后骨肉瘤MG-63細胞增殖抑制的改變，流式細胞術和MTT法進一步檢測轉染前后MG-63細胞的凋亡及ADM對轉染前后骨肉瘤MG

4、-63細胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)，觀察化學合成的特異性XIAP-siRNA對骨肉瘤細胞增殖抑制的影響以及對骨肉瘤MG-63細胞ADM藥物敏感性的影響。
　　2統(tǒng)計學方法
　　采用SPSS13.0進行分析處理，采用t檢驗和單因素方差分析，如多組間兩兩比較采用q檢驗，以P＜0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。
　　結果:
　　1 XIAP-siRNA對骨肉瘤MG-63細胞增殖有抑制作用，使細胞周期阻滯發(fā)生在細胞周期的G

5、0/1期，并能誘導凋亡。
　　2 XIAP-siRNA降低了XIAP mRNA和蛋白的表達水平。
　　3 XIAP-siRNA聯(lián)合ADM作用的細胞抑制率達（63.1±2.1）％，流式細胞儀分析顯示XIAP-siRNA組細胞的凋亡率明顯高于轉染非特異性siRNA組、空載組及未轉染組。
　　結論:
　　1特異性的化學合成XIAP-siRNA能夠下調骨肉瘤MG-63細胞XIAP基因和蛋白表達，阻滯細胞周期于G0/1期和