1、【目的】
　　前交叉韌帶(Anterior Cruciate Ligament，ACL)是穩(wěn)定膝關節(jié)的重要部分，其損傷在膝關節(jié)的運動損傷中很常見。由于ACL斷裂后愈合能力較差，目前采用自體肌腱重建ACL已成為主要手段之一，而自體游離多股Hamstring腱是目前生物力學性能最好的自體移植物，且是一種在臨床應用較廣泛的移植材料。早期愈合是保障重建韌帶最終功能及療效的重要條件，然而臨床上傳統的Hamstring腱移植也同樣可帶來一系列

2、問題，如愈合時間過長等。有研究表明細胞轉化生長因子β1(transforming growth factorβ,TGFβ1)對皮膚組織有促進愈合作用，但對腱骨愈合過程中的作用的研究則幾乎未見報道。本實驗使用腺病毒介導TGFβ1基因轉染對自體Hamstring腱重建兔ACL，通過對術后腱骨界面大體形態(tài)學、影像學及生物力學的研究，探討腺病毒介導TGFβ1基因轉染自體Hamstring腱后對ACL損傷重建的影響。
　　【方法】
　

3、　術前構建攜帶 TGFβ1基因的重組腺病毒載體 AdTGFβ1（由上海和元生物公司提供），新西蘭大白兔48只，體重2.0±0.4 kg，2-3月齡，隨機分為A、B、C三組，以實驗兔兩側后肢膝關節(jié)作為研究對象，自體Hamstring腱作為 ACL重建物。A組自體同側轉染TGFβ1的Hamstring腱重建ACL，即AdTGFβ1轉染組(實驗組)；B組自體同側轉染了腺病毒空載體AdGFP的Hamstring腱重建ACL，即 AdGFP轉染組

4、(空載體對照組)；C組自體同側 Hamstring腱重建 ACL組，即DMEM處理組(空白對照組)。術中嚴格無菌操作，術后預防性抗感染治療。每組4只實驗兔分別術后在2周、4周、8周、12周四個時間點處死，觀察、記錄移植物大體外觀，應用三維CT掃描，數字圖像工具測量和記錄骨隧道關節(jié)腔入口內部直徑，獲得的內口直徑與原始骨隧道直徑（2.0mm，鉆頭直徑）之差，得到骨隧道擴大的寬度數據；并通過CT骨密度測量軟件測量骨隧道腱骨界面新生骨組織骨密度

5、值。生物力學檢測儀測量骨-移植物-骨的最大拉伸載荷、剛度等生物力學特性，對實驗數據進行統計學分析，分析比較四組不同時間點移植物重建ACL后的影像學及生物力學的特性。
　　【結果】
　　1.解剖學大體形態(tài)
　　實驗兔生長狀況均良好，重建膝關節(jié)的功能恢復尚佳，膝關節(jié)抽屜試驗和lachnman試驗均為陰性。所有的實驗動物的膝關節(jié)周圍均未見明顯紅腫，切口良好，無感染及裂開等現象，在術后第2周后，B組解剖發(fā)現有1例發(fā)生關節(jié)內感染

6、，A組1例股四頭肌及關節(jié)腔內長滿淡黃色魚肉樣腫塊組織，其余的關節(jié)腔內有少量積液及大量滑膜增生，移植肌腱與周圍組織粘黏緊密，其邊界區(qū)分困難，未出現關節(jié)腔紅腫及積膿，其內移植物結構完整，呈白色條索致密結構。劈開骨隧道可見：在術后第2周，A組骨隧道入口內部大量疤痕組織長入；在術后第4周時，A組類似軟骨樣組織出現，且完全覆蓋骨隧道內口，這種似軟骨樣組織在B組、C組第8周部分才出現，第12周，A、B、C三組完全被軟骨樣組織覆蓋。
　　2．影

7、像學CT觀察
　　對每組進行方差齊性檢驗，均方差齊性。每組兩兩比較，在術后第4、8、12周,A組較 B、C組骨隧道入口內部直徑有明顯減小，差異有統計學意義（P<0.05）。在第4、8、12周，A組在骨隧道腱骨界面新形成骨組織的骨密度值明顯增高，差異有統計學意義（P<0.05）。
　　3.生物力學檢測
　　在術后第2周，A、B、C三組肌腱移植物分別出現7例、6例、7例骨隧道中拔出，1例、2例、1例肌腱撕裂的情況，各組顯示

8、無顯著性差異（P＞0.05）；在術后第4周，A、B、C三組肌腱移植物分別出現6例、6例、7例骨隧道中拔出，2例、2例、1例肌腱撕裂的情況，各組顯示無顯著性差異（P＞0.05）；術后第8周，A、B、C三組肌腱移植物分別出現1例、6例、6例骨隧道中拔出，7例、2例、2例肌腱撕裂的情況，兩組差異有統計學意義（P＜0.05）；術后12 周,A、B、C組三組肌腱移植物分別出現1例、2例、2例骨隧道中拔出，7例、6例、6例肌腱撕裂的情況，

9、各組顯示無顯著性差異（P＞0.05）。術后第2周，每組最大拉伸載荷無統計學意義（P＞0.05）；在術后第4周、8周、12周 A組的最大載荷較B、C兩組明顯增高，統計有顯著性差異(P＜0.05)，對比之下，在B組及C組無統計學意義（P＞0.05）；隨時間的推移，每組的剛度增加，但是組間差異均沒有統計學意義（P＞0.05）。
　　【結論】
　　本實驗TGFβ1基因重組腺病毒轉染兔Hamstring腱重建ACL的生物力學及影像學觀