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1、目的:研究光動(dòng)力作用對(duì)于肺癌細(xì)胞株A549殺傷作用的基本條件與參數(shù),應(yīng)用數(shù)學(xué)定量模型對(duì)光動(dòng)力作用的各項(xiàng)參數(shù)進(jìn)行模擬,確定模型的合理性,以期進(jìn)一步對(duì)細(xì)胞傷害結(jié)果直接模擬并提取光化學(xué)動(dòng)力參數(shù)。 方法:采用630nm大功率半導(dǎo)體激光器、德國(guó)產(chǎn)血卟啉衍生物類(lèi)光敏劑photosan3進(jìn)行光動(dòng)力反應(yīng),細(xì)胞株為肺腺癌A549;應(yīng)用MTT法測(cè)定不同培養(yǎng)板、不同光敏劑濃度、不同激光功率下PDT作用后細(xì)胞OD492值并計(jì)算細(xì)胞殘存率;流式細(xì)胞技術(shù)測(cè)
2、定PDT作用對(duì)肺癌細(xì)胞A549細(xì)胞周期的影響及細(xì)胞凋亡率的測(cè)定;應(yīng)用建立的光動(dòng)力學(xué)一般數(shù)學(xué)模型對(duì)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)結(jié)果的各反應(yīng)參數(shù)進(jìn)行模擬和解釋。 結(jié)果:采用底部澄清黑色96孔板的PDT細(xì)胞實(shí)驗(yàn)所得細(xì)胞殘存率明顯較采用普通透明96孔板為高;相同功率與能量密度下,細(xì)胞殘存率在一定范圍內(nèi)隨光敏劑濃度增加而減少,但光敏劑濃度在4mg/l以下和20mg/l以上時(shí)趨勢(shì)不明顯;相同光敏劑濃度與能量密度下,細(xì)胞殘存率在一定范圍內(nèi)隨光功率增大而下降,但功
3、率小于5mW和超過(guò)50mW時(shí)趨勢(shì)不明顯;流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期發(fā)現(xiàn)PDT組G0/G1期細(xì)胞所占比例增加,發(fā)生了G0/G1期生長(zhǎng)停頓,S期與G2/M期細(xì)胞比例減少;PDT組凋亡率明顯高于對(duì)照組;數(shù)學(xué)模型模擬了缺氧與富氧條件下不同光子密度下各參加反應(yīng)的分子隨時(shí)間的變化速率以及入射光子量變化與細(xì)胞內(nèi)受體含量衰減時(shí)間的關(guān)系。 結(jié)論:底部澄清黑色96孔板適于PDT細(xì)胞實(shí)驗(yàn),較普通透明96孔板可明顯減少實(shí)驗(yàn)誤差;在一定光敏劑濃度和激光功率
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