1、摘要目的：探討不同濃度的二十二碳六烯酸對人肝癌HepG2及SMCC一1171細(xì)胞的作用及其機(jī)制，為其應(yīng)用于肝癌的藥物預(yù)防和治療提供實驗及理論依據(jù)。方法：體外培養(yǎng)人肝癌細(xì)胞HepG2及SMCC一1171，以DHA濃度Oug／mL為陰性對照，設(shè)置濃度為15、30、45、60、75ug／mL的實驗組。采用CCK一8和流式細(xì)胞術(shù)檢測不同濃度DHA對HepG2及SMCC1171細(xì)胞生長的相對抑制率及凋亡情況，并運用熒光定量PCR及蛋白質(zhì)印跡法分別

2、從基因和蛋白質(zhì)水平分析不同濃度DHA作用前后肝癌細(xì)胞Bcatenin及cmyc表達(dá)量的變化。結(jié)果：CCK8實驗表明DHA在體外能抑制HepG2及SMCC一1171細(xì)胞生長，在DHA作用濃度為O45ug／mL，作用時間24h時，實驗組與對照組細(xì)胞吸光度A值差異有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P001)，實驗組內(nèi)兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO01)。繼續(xù)增加藥物濃度或作用時間，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。流式細(xì)胞術(shù)發(fā)現(xiàn)DHA可促進(jìn)HepG2及SMCC一1171細(xì)

3、胞凋亡，實驗組與對照組細(xì)胞凋亡率差異有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P001)，實驗組內(nèi)兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO01)。熒光定量PCR顯示DHA可下調(diào)HepG2及SMCC—l171細(xì)胞中cmyc基因表達(dá)水平，實驗組與對照組c—myc基因相對表達(dá)量的差異有顯著的統(tǒng)計學(xué)意義(P001)，實驗組內(nèi)兩兩比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(PO01)；實驗組與對照組及各實驗者組之間B—catenin基因的相對表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義。蛋白質(zhì)印跡法顯示DHA可降低Hep

4、G2及SMCC—l171細(xì)胞Bcatenin、c—myc蛋白質(zhì)的表達(dá)量(P005)。結(jié)論：DHA對人肝癌HepG2及SMCC一1171細(xì)胞有明顯的生長增殖抑制及促進(jìn)凋亡的作用，與其降低B—catenin蛋白質(zhì)水平進(jìn)而下調(diào)Cmyc基因表達(dá)水平有關(guān)。碩士研究生：李衍彥(肝膽外科)指導(dǎo)老師：曹景玉主任醫(yī)師關(guān)鍵詞：二十二碳六烯酸；肝癌；wnt／Bcatenin信號通路andthecontrolgroupandtheexperimentalgro

5、upWesternblotdemonstratedthatDHAcoulddecreasetheproteinsexpressionofI]cateninandcmycinHepG2andSMCC1171cells(PO05)Conclusion：DHACanpromotapoptosisandinhibitproliferationonHepG2andSMCC1171cells，Thepossiblemechanismisrelate