1、背景：
　　目前，腫瘤仍然是導致死亡的主要原因之一，而惡性腫瘤的主要死因是轉移復發(fā)。惡性腫瘤根治術后發(fā)生轉移通常化療效果不理想，預后較差。因此，對掌握腫瘤如何發(fā)生轉移進而研究如何阻斷轉移對減緩腫瘤的進展，降低死亡有重要意義。目前認為腫瘤的轉移主要經(jīng)過局部浸潤、滲入血管、血循環(huán)中存活、血管外滲、轉移灶內定植的過程。早在百年前Paget的“種子和土壤”學說就已經(jīng)強調了腫瘤轉移過程的兩個重要方面:轉移腫瘤細胞作為“種子”的播散作用，以及

2、腫瘤轉移靶器官微環(huán)境作為腫瘤細胞轉移定植的“土壤”作用。除外腫瘤細胞自身具有轉移的生物學特征能促進其轉移，近年來，隨著對表觀遺傳學(Epigenetics)概念的深入了解，越來越多研究表明表觀遺傳調節(jié)對腫瘤的進展、轉移密切相關。表觀遺傳學主要是指在基因序列不發(fā)生改變的基礎上，基因表達發(fā)生可遺傳變化的學科領域，表現(xiàn)為基因的轉錄調控和轉錄后調控，主要包含甲基化調控、microRNA調控和組蛋白修飾。目前眾多研究表明，表觀遺傳調控不僅在腫瘤細

3、胞本身起到重要的調節(jié)作用，而且在腫瘤細胞微環(huán)境例如纖維細胞等間質細胞中也起到重要的調控作用，在轉錄后水平調節(jié)微環(huán)境適應腫瘤細胞發(fā)展及轉移。
　　目的及內容：
　　本文主要以轉移率較高的結直腸癌和胰腺癌為例研究microRNA、甲基化等表觀遺傳在腫瘤轉移中的調控作用。研究主要內容包括兩個部分:（一）microRNAs對結直腸癌肝轉移的作用;（二）胰腺癌相關成纖維細胞的甲基化調控在胰腺癌肝、肺轉移作用研究。
　　第一部分我

4、們以伴或不伴肝轉移的結直腸癌組織microRNAs芯片譜起始，發(fā)現(xiàn)了伴肝轉移結直腸癌原發(fā)灶內12個顯著差異表達的microRNA，其中miR-320b在伴肝轉移組顯著上調，進而我們通過增殖及侵襲試驗驗證了miR-320b能促進結直腸癌腫瘤細胞的增殖和侵襲，并通過對miR-320b靶蛋白表達量變化檢測驗證其機制可能是通過競爭其同源的miR-320a靶向下游的β-catenin，Rac-1和Neuropilin-1蛋白，起到促進腫瘤進展的作

5、用。
　　第二部分，考慮到胰腺癌具有典型的豐富的癌性間質的特征，是研究腫瘤微環(huán)境的典型模型，因此我們選用了胰腺癌來具體研究表觀遺傳在腫瘤微環(huán)境中的調控作用。以KPC轉基因小鼠為模型，我們成功分離了胰腺癌原發(fā)灶及肝肺轉移灶內腫瘤細胞系和腫瘤相關成纖維細胞系(CAFs)，發(fā)現(xiàn)并在體外驗證了ALDH1a3和NQO1基因在肝轉移灶的CAFs中被特異性甲基化上調，而肝臟轉移的胰腺癌腫瘤細胞能特異性誘導轉移灶微環(huán)境中CAFs內ALDH1a3和

6、NQO1甲基化的上調。進而通過人胰腺癌及纖維細胞共培養(yǎng)后甲基化芯片譜發(fā)現(xiàn)了人胰腺癌腫瘤細胞能誘導纖維細胞內包括ALDH1a3及NQO1在內的糖代謝及ATP代謝通路基因整體甲基化上調，由此我們提出了可能的機制:“乳酸梯度”假設。為后續(xù)的研究提供了方向。
　　結論與創(chuàng)新：
　　本研究第一部分我們通過結直腸癌肝轉移來研究表觀調控對腫瘤細胞（“種子”）的作用。目前為止，對結直腸癌肝轉移相關的microRNA研究不多，在“第一部分:m

7、icroRNA對結直腸癌肝轉移”研究中所納入的伴肝臟轉移病例數(shù)是同類研究中最多，且本研究是第一次報道了在結直腸癌腫瘤細胞中，同源miR-320b和miR-320a可能通過相互競爭來實現(xiàn)相反的調控作用，為解釋哺乳動物細胞內普遍存在的同源microRNAs的作用提供了新的思路和證據(jù)。
　　在研究的第二部分，我們通過微環(huán)境豐富的胰腺癌來研究表觀調控對微環(huán)境（“土壤”）的作用。胰腺癌伴肝轉移的機制目前尚不清楚，且對胰腺癌腫瘤細胞與微環(huán)境如