1、血凝素(hemagglutinin，HA)是位于麻疹病毒表面的II型跨膜糖蛋白，主要在麻疹病毒融合到宿主細胞的過程中發(fā)揮作用。血凝素能與宿主細胞表面的CD46和SLAM兩大受體結合，并與病毒表面的融合蛋白(fusion，F(xiàn))相互作用，誘導病毒包膜與細胞膜發(fā)生融合，此外血凝素一般情況下還具有凝集猴紅細胞的作用，這一作用可能也與CD46受體結合有關。目前研究表明血凝素基因發(fā)生了變化導致出現(xiàn)抗原漂移，可能是麻疹疫情間歇的在局部區(qū)域爆發(fā)且發(fā)病率

2、提高的原因之一。
　　 本文選用2005年浙江省流行毒株MVi/Zhejiang.CHN/7.05/4(該毒株已完成了全基因組測序工作，GenBank登錄號為DQ211902)，由于HA含有跨膜區(qū)，在原核表達系統(tǒng)中跨膜區(qū)和信號肽的存在通常對重組蛋白表達不利，首先利用在線軟件分別對信號肽和跨膜區(qū)進行預測，結果顯示去除了信號肽和跨膜區(qū)的HA基因長度為1670bp，編碼559個氨基酸，預測分子量約為62KDa。從該病毒株細胞培養(yǎng)液中提

3、取總RNA，通過一步法RT-PCR擴增其血凝素基因，克隆入pGEM-Teasy載體，轉化入E.col.DH5α，用Bam.I和HindIII雙酶切鑒定重組子是正確的，雙向測序確證無突變。進一步將HA基因亞克隆至pET28a(+)表達載體，轉化BL21(DE3)，培養(yǎng)后，用終濃度為1mM的IPTG誘導重組菌表達。超聲波破碎菌體后，利用SDS-PAGE分析HA基因表達情況，結果顯示在62kDa處有一特異性條帶與目的蛋白分子量相一致，且重組蛋

4、白主要以包涵體形式存在，利用Wester.blot方法鑒定重組蛋白發(fā)現(xiàn)其抗原性良好。破碎菌體通過Ni-NTA樹脂親和層析純化獲得了的高純度目的蛋白，采用Bradford方法測定蛋白的濃度為0.3512mg/ml。純化的目的蛋白用于建立酶聯(lián)免疫吸附反應，對人群血清標本進行麻疹病毒IgG抗體檢測。實驗結果證實重組蛋白具有較好的免疫原性。在本研究中我們成功構建了麻疹血凝素基因的表達載體并在大腸桿菌中進行了誘導表達，獲得了抗原性良好的重組蛋白，