1、本研究主要內容為高產胞外多糖(exopolysaccharide,EPS)乳酸菌的篩選、培養(yǎng)基的確定、培養(yǎng)條件的優(yōu)化及乳酸菌胞外多糖在增強免疫功能方面的作用。另外，利用干酪在加工過程中的副產物乳清來合成胞外多糖。 以發(fā)酵乳制品、酸菜、泡菜等為樣品，進行了乳酸菌菌種的活化、分離、純化，共分離到乳酸菌20株。對分離到的乳酸菌進行胞外多糖高產菌株的篩選，結果篩選出植物乳桿菌為高產EPS的乳酸菌。 根據多糖的產量，從MRS、AT

2、P、SL、Eiller培養(yǎng)基中選擇高產胞外多糖的Eiller培養(yǎng)基作為植物乳桿菌合成EPS的基本培養(yǎng)基。并對碳源、氮源、鹽等對該菌株EPS生物合成的影響進行了研究。從而開發(fā)出用于植物乳桿菌EPS生物合成研究的新型合成培養(yǎng)基(命名為E1)，該培養(yǎng)基的組成為：普通蛋白胨13.3g、蔗糖13.3g、葡萄糖13.3g、酵母提取物5.0g、氯化鈉4.0g、明膠2.5g、乙酸鈉1.5g、抗壞血酸0.5g、去離子水1000mL。 選擇適當的培

3、養(yǎng)條件，根據單因素實驗結果設計L9(34)正交試驗，確定最佳發(fā)酵條件為：初始pH為5.2，45℃發(fā)酵22h，。粗多糖含量為881.90mg/L。 經提取的粗多糖，依次經DEAE-52纖維素層析和SephadexG-100凝膠層析分離，樣品濃度10mg/ml，上樣量為3ml，流速15ml/h，3ml/管分部收集，用凝膠柱層析法測得EPS I的平均分子量為EPS I的分子量為1.5×105，EPS H的分子量為1.1×104。

4、 急性毒性實驗表明，植物乳桿菌EPS安全無毒。動物實驗結果表明：與NS組相比，多糖組可以顯著提高小鼠脾臟、胸腺的重量和吞噬指數(P<0.05或P<0.01)，表明EPS可以促進非特異性免疫功能；粗多糖高劑量組可以可使小鼠足跖腫脹度明顯增加，差異具有顯著性(P<0.05或P<0.01)，表明EPS對小鼠的細胞免疫功能有促進作用；純多糖高劑量組和粗多糖高、低劑量組可以顯著的降低小鼠的血清溶血值(P<0.05或P<0.01)，表明EPS可增