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文檔簡介
1、本論文探討了同源四倍體蘿卜花粉母細胞減數(shù)分裂、雄核發(fā)育的特征及染色體行為,并將二、四倍體蘿卜的核型進行了比較分析,以期為多倍體蘿卜的遺傳育種奠定理論基礎并提供理論指導。 1.花粉母細胞減數(shù)分裂 采用常規(guī)壓片法觀察了秋水仙素誘導的同源四倍體蘿卜花粉母細胞減數(shù)分裂過程中染色體的行為,并與二倍體蘿卜作了比較。結果表明:二、四倍體減數(shù)分裂主要過程基本相似,兩者胞質分裂均為同時型。區(qū)別在于:四倍體前期Ⅰ中具有雙核仁的花粉母細胞占1
2、9.3%;中期Ⅰ染色體構型復雜,二價體占38.9%,四價體占46.5%,多價體占13.8%;25.5%的花粉母細胞中觀察到落后染色體和染色體橋現(xiàn)象;中期Ⅱ紡錘體有“八字”、垂直和平行三種類型;非正常四分體達6.7%,無十字交叉型四分體,敗育率達32.0%。與四倍體相比,二倍體蘿卜花粉母細胞減數(shù)分裂過程基本正常,未觀察到單核仁,二價體比例明顯高,占97.1%,極少出現(xiàn)單價體和多價體,基本無落后染色體現(xiàn)象,后期均為正常四分體,敗育率為12.
3、1%。 2.雄配子體發(fā)育過程 小孢子形成后進入雄配子體發(fā)育階段,利用“愛氏蘇木精染色-冬青油透明”技術,觀察了同源四倍體蘿卜雄配子體的動態(tài)發(fā)育過程。結果表明:同源四倍體蘿卜小孢子核經(jīng)第一次有絲分裂產(chǎn)生1個營養(yǎng)核和1個生殖核,生殖核再經(jīng)第二次有絲分裂形成2個精核,最終形成3-細胞型成熟花粉,與相應的二倍體雄配子的整個發(fā)育過程相似;四倍體花粉具2個、3個或4個萌發(fā)孔,二倍體多為3孔花粉;四倍體雄配子體發(fā)育過程中異常頻率為32
4、%,比二倍體高20%,敗育主要發(fā)生在四分體時期和單核期。 3.核型分析 結合前人研究染色體的經(jīng)驗,用常規(guī)壓片法確定了方便易操作的二、四倍體蘿卜根尖染色體制片的流程為:4℃浸種12h,23℃恒溫培養(yǎng),挑選生長勢強的根尖(根長0.5~1.2cm)至于冰水混合物中預處理12~24h或者用0.002M 8-羥基喹啉處理2~3h,洗凈,卡諾固定8~24h,1N HCl 60℃水浴解離10min,把殘留HCl洗凈,卡寶染色壓片。分
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