1、鋅是人體內重要的微量元素之一，是正常生長發(fā)育、基因表達、蛋白質代謝、免疫功能等過程中所必需的元素。近年來，人們對鋅與神經系統(tǒng)生長發(fā)育以及功能調節(jié)之間的關系進行了廣泛的研究，發(fā)現(xiàn)鋅缺乏可以引起神經系統(tǒng)多種疾病的發(fā)生。在中樞神經系統(tǒng)中，大部分鋅離子與蛋白質結合并維持蛋白質分子的三級結構，小部分的鋅離子以游離方式存在于含鋅神經元(zinc-enriched neuron，ZEN)軸突終末的突觸小泡中。在突觸活動中鋅離子與谷氨酸、γ-氨基丁酸(

2、gamms-aminobutyric acid，GABA)等神經遞質共同釋放到突觸間隙，參與學習和記憶的形成、神經系統(tǒng)發(fā)育以及運動和感覺功能的調節(jié)。鋅離子也存在于周圍神經系統(tǒng)中，有文獻報道幾乎所有的頸上神經節(jié)(superior cervical ganglia,SCG)神經元中均有鋅離子分布，電鏡觀察游離鋅離子主要聚集在頸上神經節(jié)交感節(jié)后神經元核周的高爾基復合體和囊泡內，鋅離子可能參與了神經元內某些含鋅蛋白質的合成與組裝，并維持某些蛋白

3、質的三級結構。在脊神經節(jié)以及坐骨神經中鋅離子也有廣泛分布。然而，鋅離子在周圍神經系統(tǒng)神經元內的聚集轉運機制以及功能尚不清楚。本研究對鋅離子在交感干內的軸突運輸以及鋅缺乏對交感干神經纖維結構的影響進行了詳細的研究。 材料與方法： 1、Wistar大鼠，體重約150g，雌雄不限，隨機分成3組。 (1)第一組進行單側交感干鉗夾手術，對側未做手術作為對照，分別使其術后存活2、4、6小時，在此期間注射硒化鈉，然后灌流取材，

4、采用金屬自顯影(AMG)的方法觀察鋅離子在交感干中的軸突運輸情況。 (2)第二組采用與上述同樣的手術方法，灌流取材后應用AMG電鏡的方法觀察鋅離子在交感干中的分布情況。 (3)第三組大鼠鉗夾單側交感干，在靠近鉗夾點的上方注射硒化鈉，同樣另一側未鉗夾作為對照，24h后灌流取下兩側頸上神經節(jié)進行AMG染色，觀察交感干中鋅離子的逆行運輸。 2、生后3周的CD-1小鼠隨機分為正常組和缺鋅組(ZnD)組，分別給予正常飼料和

5、缺鋅飼料喂養(yǎng)，5周后灌流取交感干，應用常規(guī)電鏡技術觀察交感干的結構改變，并在光鏡下比較有髓神經纖維和無髓神經纖維的數(shù)量變化，應用t檢驗比較兩組數(shù)據(jù)之間的差異。 實驗結果： 1、交感干鉗夾后，AMG實驗結果中可以看到在兩個鉗夾點的遠端和近端有AMG陽性顆粒的蓄積，此顆粒主要位于靠近鉗夾點處，但是在兩個鉗夾點之間沒有陽性顆粒的存在，并且AMG陽性顆粒隨著手術后大鼠存活時間的延長而增多。 2、AMG電鏡結果顯示在無髓神

6、經纖維中有鋅離子的AMG陽性反應產物。 3、在交感干逆行運輸?shù)腁MG實驗結果中，光鏡下觀察頸上神經節(jié)中僅有約5％的神經元有鋅離子陽性反應產物，彌散分布于神經元的胞質內，細胞核周圍染色較深，細胞核未見陽性反應，一些神經元突起內可見點線狀的AMG陽性顆粒。 4、鋅缺乏后導致小鼠交感干超微結構的改變，表現(xiàn)為髓鞘變性、排列不規(guī)則、界限不清楚，神經纖維束膜萎陷，神經軸突的橫截面積減小，形態(tài)異常的神經纖維數(shù)量增多。光鏡下觀察，缺鋅小

7、鼠交感干有髓神經纖維的數(shù)量減少，無髓神經纖維增多。 討論： 有文獻報道，坐骨神經鉗夾后通過AMG染色方法觀察到AMG陽性反應顆粒存在于鉗夾點兩端，說明坐骨神經鉗夾點的遠側端和近側端有鋅離子的蓄積，提示在坐骨神經中存在鋅離子的軸突運輸，電鏡下觀察缺鋅情況下的坐骨神經超微結構，發(fā)現(xiàn)有髓神經纖維的數(shù)量和表面積與正常飼養(yǎng)的動物相比都有所減少，髓鞘破壞變得不規(guī)則，并且發(fā)生變性，這些都證明鋅可能對周圍神經的相關功能具有一定的作用，因

8、而我們推測交感干中也有鋅離子的運輸，并且對其結構的保持及功能的發(fā)揮起到關鍵性作用。應用AMG和AMG電鏡技術，本實驗證實了游離鋅離子在交感干的軸突內進行軸突運輸。研究發(fā)現(xiàn)，鉗夾手術后，注射硒化鈉，在鉗夾點的兩側端均有不同程度的鋅離子蓄積，并且有隨著手術后存活時間的延長鋅離子蓄積增多的現(xiàn)象，提示大多數(shù)或全部交感節(jié)后含鋅神經元胞體內的鋅離子可能通過順行運輸?shù)竭_軸突終末并參與某些生理功能的調節(jié)，而且也有鋅離子由軸突終末向胞體逆行運輸。應用AM