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文檔簡介
1、目的:以缺氧/復氧模擬心肌細胞和成纖維細胞的缺血/再灌注損傷模型,探討缺血/再灌注期間大鼠心肌細胞及成纖維細胞MCT1表達的變化及其與缺血/再灌注損傷之間的關系。
方法:采用胰蛋白酶消化法和差速貼壁法體外培養(yǎng)和純化Wistar 大鼠心肌細胞和成纖維細胞,以缺氧3h /復氧60min模擬缺血/再灌注損傷,以缺氧前為正常對照。在缺氧前、缺氧3h、復氧30min、復氧60min 四個時點檢測培養(yǎng)上清內乳酸濃度;并以RT-PCR與
2、Western blot 檢測細胞內MCT1mRNA和蛋白水平。
結果:1.MCT1在心肌細胞和成纖維細胞中皆有表達,正常的心肌細胞MCT1mRNA和蛋白表達水平均高于成纖維細胞(P<0.01); 2.心肌細胞中MCT1在缺氧3h后表達下降(P<0.01),復氧30min后上升(P<0.01),復氧60min后恢復到缺氧前水平; 3.成纖維細胞中MCT1在缺氧后和復氧后均表達上升(P<0.01); 4.心肌細胞和成纖維細胞
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