1、急性白血病(AL)是一組異質(zhì)性疾病，無論在形態(tài)學、細胞遺傳學、免疫表型、分子遺傳學和臨床特征上都存在很大的差異。近幾十年來，隨著細胞遺傳學和分子遺傳學的發(fā)展，核型分析已經(jīng)成為臨床實踐中的一項常規(guī)檢查項目，對于AL的診斷和預后起重要作用。然而，目前文獻報道的數(shù)據(jù)絕大多數(shù)來自于西方國家的統(tǒng)計。近年來，一些研究者已經(jīng)發(fā)現(xiàn)血液腫瘤的疾病性質(zhì)具有人種差異。但這些研究大多局限于例數(shù)較少的病例，大規(guī)模的統(tǒng)計屈指可數(shù)。特別是針對中國患者群至今沒有進行過

2、大樣本的系統(tǒng)研究。在這一背景下，我們對十幾年來在本院接受細胞遺傳學分析的兩千多名初發(fā)AL患者的染色體性狀進行了回顧性研究，對異常類型進行分類并計算人口發(fā)生率，進而將這些統(tǒng)計結果與其它國家和地區(qū)的報道進行比較，希望得出一個較全面的、反映中國患者群特征的急性白血病細胞遺傳學譜。 另一方面，作為新興的表觀遺傳學和表觀基因組學最重要的研究內(nèi)容，關于CpG島的甲基化所致抑癌基因轉錄失活，進而影響腫瘤發(fā)生、發(fā)展這一問題也成為研究熱點。攜帶A

3、L特有的染色體易位/倒位的動物模型提示，單純的遺傳物質(zhì)改變不足以誘導血液惡性腫瘤的發(fā)生，在很多情況下，表現(xiàn)遺傳學修飾一同參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和惡化，成為這一過程中不可或缺的因素。然而，盡管抑癌基因的甲基化已經(jīng)成為白血病細胞中的普遍現(xiàn)象，只有少數(shù)基因的甲基化狀態(tài)已經(jīng)被確定與患者的臨床特征及預后有關。因此，我們對多個基因在AL患者中的甲基化狀態(tài)進行研究，并分析了基因甲基化與患者臨床特征及預后之間的關系。 第一部分急性髓細胞白血病的細

4、胞遺傳學研究 目的：探討急性髓細胞白血病(AML)的細胞遺傳學特征，主要核型異常的發(fā)生情況以及不同人種之間的差異。 方法：對1994年至2007年在本院血液研究所進行核型分析的1432例初發(fā)AML患者的細胞遺傳學特征進行回顧性分析，并將本研究結果與目前文獻中最具代表性的大樣本報道進行比較。 結果：在1，432名患者中，有1，293例核型分析成功(90％)，其中746例(58％)觀察到克隆性異常，異常率與文獻報道接

5、近。發(fā)生頻率最高的染色體異常為t(15；17)，見于所有分析成功病例的14％，其次為t(8；21)，發(fā)生率8％，t(9；22)，+21和+8，發(fā)生率均為2％。在不同的FAB亞型中，M3患者發(fā)生染色體易位的比例最高，為58％；M1患者中發(fā)生染色體丟失的比例最高，為18％；而M5患者中發(fā)生三倍體的比例最高，為29％。復雜核型最常見于M0亞型，占其總數(shù)的17％。在0-60歲之間，AML的總體發(fā)病率隨年齡增長而上升，從0-9歲的0.3例/100

6、，000人增加到50-59歲的6.2例/100，000人，60歲以后開始隨年齡增長而下降，從60-69歲的4.9例/100，000人減少到80歲后的1.4例/100，000人。 結論：超過半數(shù)的初發(fā)AML患者伴有克隆性染色體異常。FAB亞型、AML患者的年齡分布以及常見核型異常的發(fā)生率在不同人種之間存在較大差異。 第二部分急性淋巴細胞白血病的細胞遺傳學研究 目的：探討急性淋巴細胞白血病(ALL)的細胞遺傳學特征，

7、主要核型異常的發(fā)生情況以及不同人種之間的差異。 方法：對1994年至2007年在本院血液研究所進行核型分析的585例初發(fā)ALL患者的細胞遺傳學特征進行回顧性分析，并將本研究結果與目前文獻中最具代表性的大樣本報道進行比較。 結果：585名ALL患者中共有551例核型分析成功(成功率94％)，其中300例(49％)觀察到克隆性染色體異常。119例(22％)為高超二倍體(＞50條染色體)。發(fā)生頻率最高的染色體易位是t(9；22

8、)，見于11％的患者，其次是11q23重排和T細胞受體(TCR)異常，發(fā)生率均為2％。不伴常見染色體易位的復雜核型見于20名(4％)患者。根據(jù)2000年浙江省人口普查的統(tǒng)計數(shù)據(jù)，我們計算了ALL在各年齡段的發(fā)病率。在我們統(tǒng)計的人群中，ALL的發(fā)病率有兩個年齡峰。第一個年齡峰是15-19歲，發(fā)病率為2.4例/100，000人，第二個年齡峰是55-59歲，發(fā)病率為2.3例/100，000人。 結論：接近半數(shù)的初發(fā)ALL患者伴有克隆性

9、染色體異常。ALL患者的年齡分布及常見核型異常的發(fā)生率在不同人種之間存在較大差異。 第三部分急性白血病的DNA甲基化研究 目的：探討抑癌基因DKK3、TMS1、DAPK、ASPP1和WIF1在急性髓細胞白血病(AML)中的甲基化情況，以及DNA甲基化在AML中的潛在預后價值。 方法：采用甲基化特異性PCR(MSP)檢測71例初發(fā)AML骨髓樣本中DKK3、TMS1、DAPK、ASPP1和WIF1五個基因的甲基化情況

10、，并結合患者的臨床表現(xiàn)及預后數(shù)據(jù)分析抑癌基因啟動子甲基化與AML患者臨床特征及預后之間的關系。 結果：在71例骨髓樣本中，DKK3的甲基化頻率為63.4％(45/71)，DAPK的甲基化頻率為60.6％(43/71)，而TMS1、ASPP1和WIF1均未檢測到甲基化?？ǚ椒治霭l(fā)現(xiàn)，DKK3和DAPK的甲基化狀態(tài)有顯著相關性(P=0.006)。＞60歲的患者DAPK甲基化頻率明顯高于≤60歲的患者(87.5％vs．57.1％，P=

11、0.037)。發(fā)生DAPK甲基化的患者治療前外周血WBC計數(shù)明顯高于不發(fā)生DAPK甲基化的患者(57.2×109/Lvs．11.2×109/L，P=0.017)。此外，不發(fā)生DAPK甲基化的患者一次誘導緩解率高達92.3％，而發(fā)生DAPK甲基化的患者緩解率僅為54.2％(P=0.018)。對于伴預后中等核型且接受常規(guī)化療的患者進行的Kaplan—Meier生存曲線分析發(fā)現(xiàn)，發(fā)生DAPK甲基化的患者平均無復發(fā)生存時間為13.2個月，而DA