1、,,,農藥殘留的快速檢測,2,主要內容,前言國內現(xiàn)行農藥殘留快速檢測方法農殘快速檢測方法展望,3,一、前言,,隨著人們環(huán)境意識的不斷加強，由農藥引起的食品安全問題也越來越受到人們的關注。為了保障消費者的安全和健康，提高農產品的質量安全水平，增強農業(yè)產品的國際競爭力，我國政府決定加強農產品中農藥殘留的監(jiān)控，建立健全農藥殘留的檢測體系，實施對蔬菜、瓜果、茶葉生產全過程的農藥監(jiān)控，從源頭抓起，加強農產品的產地檢測，把住農產品的市場準入關。

2、,4,（一）農藥概念 農藥(pesticides)是指農藥是指用于預防、消滅或者控制危害農業(yè)、林業(yè)的病、蟲、草及其他有害生物，以及有目的地調節(jié)植物、昆蟲生長的藥物的通稱。 現(xiàn)在農藥不僅應用于農業(yè)，而且也廣泛應用于畜牧業(yè)、林業(yè)和公共衛(wèi)生事業(yè)等方面。,5,（二）農藥殘留的概念,農藥殘留是指農藥使用后殘存于生物體、食品(農副產品)和環(huán)境中的微量農藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質的總稱。,6,（三）農藥的

3、分類,1.按化學成分可分為有機氯、有機磷、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類及砷、汞、銅、硫磺等制劑。 2.按用途可分為殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、植物生長調節(jié)劑和糧食熏蒸劑等。,7,（四）農藥的毒性及種類,農藥除了可造成人體的急性中毒外，絕大多數對人體產生的慢性危害，多是通過污染食品的形式造成。某些農藥對人和動物的遺傳和生殖造成影響，產生畸形和引 起癌癥等方面的毒素作用。,8,1、有機氯農藥,容易在人體內蓄積慢性毒性作用，主

4、要表現(xiàn)在侵害肝、腎及神經系統(tǒng)，動物實驗證實有致畸、致癌作用我國1983年停止生產，1984年停止使用這類農藥,9,六六六，BHC,滴滴涕，DDT,10,滴滴涕：減少了蛋殼的厚度，從而降低了小鳥的孵出率。二惡英：進入機體后幾乎不被排泄、沉積在肝臟和脂肪組織中。屬于劇毒物質，毒性比氰化鉀高50—1000倍，致癌毒性比黃曲霉毒素高10倍，會引起基因突變，影響繁殖力和智力發(fā)育。,11,早期的高效高毒品種：對硫磷（1605）、甲拌磷（39

5、11）、內吸磷（1059）后期使用得較多的為高效低毒低殘留的品種，如：樂果、敵百蟲、殺螟松、倍硫磷毒性極低的馬拉硫磷、雙硫磷、氯硫磷、鋅硫磷、碘硫磷、地亞農、滅蜈松,2、有機磷農藥,12,有機磷農藥主要品種,甲胺磷,乙酰甲胺磷,13,樂 果,一六0五,14,急性毒性：有機磷農藥化學性質不穩(wěn)定，分解快，在作物中殘留時間短。抑制血液和組織中膽堿酯酶的活性，引起乙酰膽堿在體內大量積聚而出現(xiàn)一系列神經中毒癥狀，如神經功能紊亂、出汗、

6、震顫，精神錯亂、語言失常等。,15,主要表現(xiàn)為植物性食物殘留，尤其是含有芳香物質的植物如：水果、蔬菜，特別是葉菜類如小白菜、大白菜、雞毛菜、甘藍、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、綠花菜、茼蒿、枸杞菜和黃瓜等,16,3、氨基甲酸酯類農藥,西維因、殺滅威、速滅威、葉蟬散等除草劑：敵草隆、敵稗 在作物上的殘留時間為4d，在動物的肌肉和脂肪中的明顯蓄積時間約為7d殘留量很低,17,氨基甲酸酯類殺蟲劑進入人體內，在胃中酸性條件下可與食物中的

7、亞硝酸鹽和硝酸鹽反應生成亞硝基化合物，具有致癌性。,,（五）傳統(tǒng)農殘分析技術一般過程,19,,（六）傳統(tǒng)農殘分析技術的優(yōu)缺點,20,傳統(tǒng)的農殘化學分析主要是氣相或液相色譜等儀器 優(yōu)點：敏感(10－l2 ～10－6 mol／L) 、準確 缺點：操作復雜、費時及成本高。 難以滿足需求 －－怎么辦？

8、 －－發(fā)展適合我國的快速檢測技術,,21,生化檢測生物檢測化學比色法,二、適合我國的農藥殘留快速檢測方法,,酶抑制法,免疫分析法,,發(fā)光菌檢測法,敏感家蠅檢測法,,速測卡,速測儀,主要為酶免疫法,22,酶抑制法,酶抑制技術是研究比較成熟、應用最廣 泛快速的農藥殘留檢測技術，是根據有機磷和氨基甲酸酯類農藥對乙酰膽堿酯酶（AChE)的特異性生化反應建立起來的農藥殘留的微量和痕量快速檢測技術。,23,1、速測卡法,,24,

9、速測卡檢測結果,“-”陰性（藍色） “+”弱陽性（淡藍） “++”強陽性（白色）,25,2、速測儀,原理:在一定條件下，有機磷和氨基甲酸酯類農藥對膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農藥的濃度呈正相關。酶催化乙酰膽堿水解，其水解產物與顯色劑反應，產生黃色物質。 用分光光度計在412nm處測定吸光度隨時間的變化，計算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機磷或氨基甲酸酯類農藥的存在。,,26,農藥殘留快速測試

10、儀,27,速測儀檢測結果,抑制率與農藥殘留量成正相關，抑制率越高說明殘留量越高,28,免疫分析技術,免疫分析技術是將免疫反應與現(xiàn)代測試手段相結合而建立的超微量分析技術，是基于抗原抗體特異性結合和反應為基礎的分析方法。目前應用于農殘檢測的是酶免疫分析(EIA)和放射性免疫分析(RIA)。其中酶聯(lián)免疫分析技術應用最為普遍。,29,3、酶聯(lián)免疫技術 ELISA是一種以酶作為標記物的免疫分析方法，也是目前應用最廣泛的

11、免疫分析方法之一，它將酶標記在抗體／抗原分子上形成酶標抗體／酶標抗原，酶作用于能呈現(xiàn)出顏色的底物，通過儀器或肉眼進行辨別。,30,ELISA法基本原理是預先結合在固相載體上的抗體或抗原分子與樣品中的抗原或抗體分子在一定條件下進行免疫學反應。該法因不需昂貴儀器設備，對人體無害等優(yōu)點而被廣泛采用，具有靈敏、特異、快速、穩(wěn)定以及易于自動化操作等特點。,31,目前，ELISA方法常用的固相載體是96孔聚苯乙烯酶標板，常用的酶是辣根過氧化物酶，

12、常用的底物是鄰苯二胺和四甲基聯(lián)苯胺等。,酶標板 u型 96孔,32,4、發(fā)光菌檢測法,農藥與細菌作用后可影響細菌的發(fā)光程度，通過細菌發(fā)光情況，可測出農藥殘留量。 此方法簡便但是特異性差,33,5、敏感家蠅檢測法,敏感家蠅對殺蟲劑具有敏感性，記錄家蠅存活情況，根據家蠅的死亡率可知農藥殘留情況。該技術方法直接、過程簡單、容易掌握，但定性粗糙，只對少數農藥有效，而且由于其他生物對不同農藥的毒性反應與人畜可能不同，因此影響對農藥殘留

13、量的判斷。如家蠅對毒性較低的除蟲菊酯類敏感，遠超過有機磷和氨基甲酸酯類中毒或高毒的農藥。,34,6、化學比色法,目前常用的化學比色法包括各種檢測試劑和試紙，兩者都是利用迅速產生明顯顏色的化學反應檢測待測物質，可通過與標準比色卡比較進行目視定性或半定量分析。,35,化學比色分析法與一般的儀器分析方法相比，具有價格低，操作相對簡便，結果顯示直觀，一次性使用，不需檢修維護，有一定的靈敏度和專一性等優(yōu)點。隨著檢測儀器的不斷發(fā)展，與其相配套的微型

14、檢測儀器也相應出現(xiàn)。如與試劑檢測方法相配套的微型光電比色計目前已發(fā)展得比較成熟。,36,三、農藥殘留快速檢測技術展望,一些快速速檢測方法與國家標準方法和儀器法相比具有操作簡單、快速的優(yōu)點，但由于大多數快速檢測方法在食品樣品前處理、操作規(guī)范性方面還有許多待完善之處，目前還只能作為快速篩選的手段而不能作為最終診斷的依據，兼具快速和準確兩大優(yōu)點是快速檢測方法追求的目標。,37,目前的食品現(xiàn)場快速檢測主要呈現(xiàn)4大趨勢：1 由于高新技術的應用，

15、檢測能力不斷提高，檢測靈敏度越來越高，殘留物的超痕量分析水平已達到了10-7g2 檢測速度不斷加快，智能化芯片和高速電子器件與檢測器的使用，使食品安全檢測周期大大縮短3 選擇性不斷提高，高效分離分段、各種化學和生物選擇性傳感器的使用，使在復雜混合體中直接進行污染物選擇性測定成為可能；4 由于微電子技術、生物傳感器、智能制造技術應用，檢測儀器向小型化、便攜化方向發(fā)展，使實時、現(xiàn)場、動態(tài)、快速檢測正在成為現(xiàn)實。針對我國的特殊國情，目前

16、我國基層單位很多速測技術的應用還只處于定性或半定量水平，易用型的小型化儀器的應用是目前和今后快速檢測技術的發(fā)展趨勢。,38,儀器分析技術中的色譜技術被認為是最經典、最常用的檢測技術。傳統(tǒng)色譜檢測時長、成本高，需要加快在樣品預處理技術和檢測技術方面的研究。如樣本預處理技術中的固相萃取（SPE）技術和微固相萃?。⊿PME)技術以及超臨界流體萃取技術方面的研究，檢測技術方面的二維色譜技術的研究。,5 儀器分析在農藥殘留快速檢測方面的進展,食品