1、目的：肝星狀細胞（HSC）的活化是肝纖維化過程中的一個關鍵環(huán)節(jié)。TGF-β信號通路在肝纖維化過程中發(fā)揮著關鍵作用。HES1的蛋白表達與活化的肝星狀細胞呈正相關關系，它所屬的一類轉錄因子能與DNA結合序列class C（CACGNG）結合。通過轉錄因子圈套策略（Decoy ODN）篩選出能抑制TGF-β信號通路的class C Decoy ODNs，來抑制HSC的活化。另外，將有效的class C Decoy ODNs與Smad3 Dec

2、oy ODN聯(lián)合作用活化的肝星狀細胞，觀察對TGF-β信號通路的抑制作用能否更好。
　　方法：
　　(1)通過生物信息學技術預測分析TGF-β信號通路中TGF-β及其下游靶基因（如COLΙα1、TIMP1、α-SMA等）的啟動子區(qū)與class C序列匹配程度；
　　(2)通過熒光素酶報告基因分析法檢測class C Decoy ODNs對TGF-β信號通路中TGF-β及其下游靶基因啟動子活性的影響；
　　(3)通

3、過Western blot方法進一步驗證class C Decoy ODNs對TGF-β信號通路中TGF-β及其下游靶基因在蛋白水平的影響；
　　(4)通過熒光素酶報告基因分析法檢測能影響TGF-β及其下游靶基因啟動子活性的Decoy ODNs組合。
　　結果：
　　(1)通過生物信息學分析發(fā)現(xiàn)TGF-β及其靶基因COLΙα1、TIMP1、α-SMA以及HES1的啟動子上有class C序列的存在，而COLΙα2的基因

4、啟動子區(qū)內沒有class C序列存在；
　　(2)通過熒光素酶報告基因分析法檢測出能下調TGF-β信號通路中TGF-β及其下游靶基因啟動子或增強子水平的class C Decoy ODNs，其中包括class C1 Decoy ODN、class C2 Decoy ODN、class C3 Decoy ODN以及class C4 Decoy ODN；
　　(3) Western blot進一步驗證發(fā)現(xiàn)4種class C De

5、coy ODNs中，對TGF-β及其靶基因影響范圍較廣的是class C1 Decoy ODN，下調效果相對較好的是class C2 Decoy ODN，而class C3 Decoy ODN與class C4 Decoy ODN對其影響效果差；
　　(4)通過熒光素酶報告基因分析法篩選出一定程度上能影響TGF-β及其下游靶基因啟動子活性的Decoy ODN組合，包括class C1 Decoy ODN與Smad3 Decoy O

6、DN的組合，以及class C2 Decoy ODN與Smad3 Decoy ODN的組合，而且第一種組合比第二種組合對TGF-β及其下游靶基因啟動子活性下調作用好。
　　結論：Class C1/2 Decoy ODN能通過抑制TGF-β信號來抑制大鼠肝星狀細胞的活化。Class C1 Decoy ODN聯(lián)合Smad3 Decoy ODN，能夠下調活化的大鼠肝星狀細胞中，TGF-β應答元件TRE活性，以及TGF-β靶基因TIMP1