1、目的：
　?。?）研究Notch信號(hào)通路的活化在長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛大鼠中的作用，探討活化的Notch信號(hào)通路是否通過(guò)促進(jìn)脊髓小膠質(zhì)細(xì)胞CX3CR1信號(hào)通路活化誘導(dǎo)大鼠產(chǎn)生痛覺(jué)過(guò)敏反應(yīng)。
　?。?）基于活化的Notch信號(hào)通路對(duì)化療痛大鼠的影響，探討天麻素治療化療痛大鼠的作用機(jī)制。
　　方法：
　　（1）第一部分：研究Notch信號(hào)通路的活化對(duì)長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛的調(diào)控作用。大鼠鞘內(nèi)置管并篩選出痛閾

2、值合格的SD大鼠40只，采用隨機(jī)配伍的方法分為4組：對(duì)照組、長(zhǎng)春新堿致化療痛模型組、DAPT多次給藥+長(zhǎng)春新堿致化療痛組、DAPT單次給藥+長(zhǎng)春新堿致化療痛組。用隔日腹腔注射長(zhǎng)春新堿（125μg/kg）的方法建立化療痛動(dòng)物模型，Notch信號(hào)通路抑制劑DAPT從建立化療痛模型前1日起鞘內(nèi)注射（50μg/rat，1μL），其它各組同步注射生理鹽水。分別用Electronic vonfrey測(cè)痛儀、熱輻射測(cè)痛儀、冷板測(cè)痛儀測(cè)定大鼠機(jī)械痛閾值

3、、熱痛閾值及冷痛閾值，免疫組化法檢測(cè)Notch信號(hào)通路活化標(biāo)志物NICD、小膠質(zhì)細(xì)胞特異性活化標(biāo)志物Iba-1的表達(dá)，Western Blot法檢測(cè)脊髓NICD、CX3CR1蛋白、P-p38蛋白表達(dá)，RT-PCR法檢測(cè)Notch1 mRNA、Hes1 mRNA表達(dá)，ELISA法檢測(cè)TNF-α、IL-1β蛋白表達(dá)。
　　（2）第二部分：基于Notch信號(hào)通路探討天麻素對(duì)長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛大鼠治療的作用機(jī)制。根據(jù)痛閾值大小篩選

4、出合格的SD大鼠40只，采用隨機(jī)配伍的方法分為4組：對(duì)照組、長(zhǎng)春新堿致化療痛模型組、天麻素低劑量（60 mg/kg）+長(zhǎng)春新堿致化療痛組、天麻素高劑量（120 mg/kg）+長(zhǎng)春新堿致化療痛組。用隔日腹腔注射長(zhǎng)春新堿（125μg/kg）的方法建立化療藥物誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛動(dòng)物模型，第9日采用不同劑量的天麻素治療化療痛大鼠，分別測(cè)定化療痛大鼠機(jī)械痛閾值、熱痛閾值及冷痛閾值，免疫組化法檢測(cè)Notch信號(hào)通路活化標(biāo)志物NICD、小膠質(zhì)細(xì)胞特

5、異性活化標(biāo)志物Iba-1的表達(dá)，Western Blot法檢測(cè)脊髓NICD、CX3CR1蛋白、P-p38蛋白表達(dá)，RT-PCR法檢測(cè)Notch1 mRNA、Hes1 mRNA表達(dá)，ELISA法檢測(cè)TNF-α、IL-1β蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果：
　?。?）第一部分：研究Notch信號(hào)通路的活化對(duì)長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛的調(diào)控作用。與對(duì)照組比較，長(zhǎng)春新堿致化療痛模型組大鼠機(jī)械痛閾值、熱痛閾值、冷痛閾值和Notch1 mRNA表達(dá)

6、水平顯著降低，脊髓背角NICD、Iba-1蛋白、CX3CR1蛋白、P-p38蛋白、Hes1 mRNA和TNF-α、IL-1β蛋白表達(dá)顯著升高；與長(zhǎng)春新堿致化療痛模型組比較，DAPT多次給藥+長(zhǎng)春新堿致化療痛組、DAPT單次給藥+長(zhǎng)春新堿致化療痛組大鼠機(jī)械痛閾值、熱痛閾值和冷痛閾值和Notch1 mRNA表達(dá)水平均升高，脊髓背角NICD、Iba-1蛋白、CX3CR1蛋白、P-p38蛋白、Hes1 mRNA和TNF-α、IL-1β蛋白表達(dá)顯

7、著降低。
　?。?）第二部分：基于Notch信號(hào)通路探討天麻素對(duì)長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)神經(jīng)病理性疼痛大鼠治療的作用機(jī)制。與對(duì)照組比較，長(zhǎng)春新堿致化療痛組大鼠機(jī)械痛閾值、熱痛閾值、冷痛閾值和Notch1 mRNA表達(dá)水平顯著降低，脊髓背角NICD、Iba-1蛋白、CX3CR1蛋白、P-p38蛋白、Hes1 mRNA和TNF-α、IL-1β蛋白表達(dá)顯著升高；與長(zhǎng)春新堿致化療痛組比較，天麻素高低劑量+長(zhǎng)春新堿致化療痛組大鼠機(jī)械痛閾值、熱痛閾值冷痛

8、閾值和Notch1 mRNA表達(dá)水平有不同程度的升高，脊髓背角NICD、Iba-1蛋白、CX3CR1蛋白、P-p38蛋白、Hes1 mRNA和TNF-α、IL-1β蛋白表達(dá)有不同程度的降低。
　　結(jié)論：
　　（1）Notch信號(hào)通路的活化可能參與了長(zhǎng)春新堿誘導(dǎo)的神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生、發(fā)展，抑制Notch信號(hào)通路的活化可抑制大鼠脊髓背角小膠質(zhì)細(xì)胞CX3CR1信號(hào)通路的活化，緩解化療痛大鼠機(jī)械痛、熱痛、冷痛敏感反應(yīng)。