1、目的：
　　觀察不同濃度染料木素對人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1作用及其抑癌基因表達的的研究，從而為臨床治療胰腺癌提供新的思路方法。
　　方法：
　　本實驗共分實驗組（80，120，160，200μmol/L）的染料木素、空白對照組（PBS）和標準對照(吉西他濱)。各組培養(yǎng)基處理細胞12h、24h、36h、48h、60h后，細胞計數(shù)試劑盒（CCK-8）法檢測人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1在染料木素作用下的增殖活性；流式細胞術(shù)檢

2、測人胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1在染料木素木素作用下的凋亡細胞百分率；用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶連反應（RT-PCR）方法測定P53及P21抑癌基因的表達；Western blot法檢測抑癌基因P53和P21的蛋白表達水平。實驗結(jié)果統(tǒng)計學分析:細胞凋亡與細胞基因mRNA采用的是LSD法，細胞增殖數(shù)據(jù)采用的是配對t檢驗，P<0.05比較差異有統(tǒng)計學意思。
　　結(jié)果：
　　1.CCK-8法檢測染料木素對胰腺癌細胞（PANC-1）的生長抑制作用

3、
　　分別對160μmol/L與200μmol/L、120μmol/L與200μmol/L、160μmol/L與GEM組、200μmol/L與GEM組通過SPSS13.0進行配對樣本t檢驗，結(jié)果顯示160μmol/L對GEM組無統(tǒng)計學差異(P=0.067)，而其余三組P值均小于0.05；針對36h以內(nèi)的數(shù)據(jù)，統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)120μmol/L對GEM組P值亦小于0.05，而200μmol/L與GEM組無統(tǒng)計學差異(P=0.051)。根據(jù)以

4、上結(jié)果，我們認為染料木素總體呈濃度依賴性和時間依賴性，其中36h內(nèi)200μmol/L效果與GEM組較為接近，但160μmol/L總體效果最好，且與GEM組最為接近。
　　2.流式細胞儀（FCM）各組凋亡指數(shù)比較
　　FCM結(jié)果可以看出，4個染料木素分組中，80μmol/L對細胞增殖抑制效果并不明顯，而120μmol/L和160μmol/L最接近GEM組的效果，200μmol/L晚期凋亡細胞占大部分?？梢娙玖夏舅氐淖饔糜忻黠@的

5、濃度依賴性。
　　3.Western bloting檢測P53、P21等相關(guān)蛋白表達
　　Western-blot檢測蛋白水平顯示160μmol/L和200μmol/L染料木素相對于空白對照能夠明顯的增強抑癌基因P21和P53的蛋白水平的表達，相對于標準組沒有明顯的差異。
　　結(jié)論：
　　1.通過FCM和CCK-8法表明染料木素作用具有濃度依賴性和時間依賴性，但是在低濃度時，染料木素的作用并不理想，而當濃度達到1

6、60μmol/L以上時其FCM結(jié)果與標準對照組吉西他濱非常接近，濃度達到200μmol/L時晚期凋亡細胞已占60％以上
　　2.CCK-8法細胞增殖的結(jié)果顯示160μmol/L的抑制效果在48h達到最佳，整體效果最好且曲線與標準對照相近，而Western-blot結(jié)果顯示染料木素對P21、P53蛋白均有明顯上調(diào)作用，濃度依賴性小。
　　3.我們推斷濃度為160μmol/L染料木素對胰腺癌細胞株P(guān)ANC-1的抑制作用最佳，其可