骨髓間充質(zhì)干細胞移植對環(huán)磷酰胺誘導的卵巢損傷大鼠卵巢功能的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文主要探討骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSC)移植對環(huán)磷酰胺(CTX)誘導的大鼠卵巢損傷的影響。
  方法:
  采用CTX連續(xù)腹腔注射(首負荷50mg/kg,之后按10mg/kg.d連續(xù)腹腔注射14天)誘導大鼠卵巢損傷,每日8時取陰道脫落細胞檢查,觀察大鼠動情周期變化來建立卵巢損傷模型。
  取出生14天的SD大鼠的骨髓進行原代培養(yǎng)BMSC,傳代擴增及鑒定,獲取第3-6代細胞進行移植。
  將要進行實驗的大鼠分成為三

2、個組。包括空白對照組,模型組及細胞移植組??瞻讓φ战M的處理方法是每次應用生理鹽水1ml進行腹腔注射,每天注射一次,共用15天。模型組:于第一天給予負荷劑量CTX腹腔注射,即50mg/kg溶于1ml生理鹽水中,之后按10mg/kg.d溶于1ml生理鹽水中,繼續(xù)給藥14天。細胞移植組按模型組給藥方法,但在第一天給藥后24小時左右給予尾靜脈移植BMSC,移植細胞量約為5×106/0.5ml。在停止給藥后1周處死所有動物。心臟取血后采用放射免疫

3、法檢測血清E2,F(xiàn)SH及LH水平,收集各組卵巢組織進行檢測。
  結(jié)果:
  (1)與空白對照組對比,模型組和細胞移植組的雌二醇(E2)均下降(P<0.05),黃體生成素(LH)均升高(P<0.05),模型組卵泡刺激素(FSH)升高(P<0.05),但細胞移植組的FSH無明顯改變(P>0.05);與模型組對比,細胞移植組的E2顯著升高,F(xiàn)SH及LH顯著下降(P<0.05);
 ?。?)與空白對照組比較,模型組及細胞移植

4、組總卵泡數(shù)量下降(P<0.05),以中大卵泡數(shù)下降為主(P<0.05),但是細胞移植組總卵泡數(shù)及中大卵泡數(shù)較模型組顯著增加(P<0.05),
 ?。?)卵巢組織TUNEL法檢測模型組及細胞移植組AI較空白對照組增加(P<0.05),但是細胞移植組AI較模型組顯著下降(P<0.05);
 ?。?)免疫組織化學法檢測發(fā)現(xiàn)卵泡顆粒細胞胞質(zhì)中存在Bax及Bcl-2蛋白表達,空白對照組的卵泡顆粒細胞胞質(zhì)中散在表達Bax蛋白;模型組卵泡

5、顆粒細胞質(zhì)中Bax蛋白的表達顯著增加,尤其是在閉鎖卵泡中;細胞移植組卵泡顆粒細胞胞質(zhì)中Bax蛋白的表達范圍明顯小于模型組??瞻讓φ战MBcl-2蛋白在卵泡顆粒細胞胞質(zhì)中表達顯著,模型組Bcl-2蛋白在卵泡顆粒細胞胞質(zhì)中很散在表達,細胞移植組Bcl-2蛋白表達范圍明顯大于模型組;
 ?。?)免疫印記法進行半定量檢測結(jié)果提示模型組及細胞移植組較空白對照組的卵巢組織Bax蛋白表達量顯著升高(P<0.05),Bcl-2蛋白表達量顯著下降(P

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