1、目的:通過電化學陽極氧化法制備出二氧化鈦納米管材料，負載慶大霉素并在表面涂覆聚乳酸乙醇酸(PLGA)膜，研究其藥物載藥率及釋放特點。并通過體外及動物實驗探索其抗菌性能。
　　方法:1.二氧化鈦納米管抗菌材料制備及相關檢測:(1)采用電化學陽極氧化法制備不同孔徑納米管材料;(2)采用負壓吸引法將慶大霉素載入二氧化鈦納米管，通過掃描電鏡、EDS能譜分析確定藥物載入并計算載藥率;(3)采用涂覆法制備材料表面PLGA膜，并用光學顯微鏡觀察

2、其形貌;(4)將載藥后的二氧化鈦納米管材料，根據有無PLGA膜分兩組，分別測定兩組材料藥物釋放率進行對比;
　　2.載藥二氧化鈦納米管的體外抗菌性能檢測:(1)實驗分組:A組:負載慶大霉素且覆蓋有PLGA膜的二氧化鈦納米管材料組;B組:負載慶大霉素未覆蓋有PLGA膜的二氧化鈦納米管材料組;C組:未負載慶大霉素但覆蓋有PLGA膜的二氧化鈦納米管材料組;D組:空白對照;每組3個;(2)采用抑菌圈檢測法:制備MH瓊脂細菌平板、制作抑菌實

3、驗裝置，MH瓊脂細菌板需要每3天更換一次，定期記錄抑菌圈直徑大小，評價各組材料抗菌性能。
　　3.載藥二氧化鈦納米管的動物體內抗菌性能檢測:(1)建立體內實驗大鼠肢體感染模型，確定引起肢體感染的恰當細菌濃度。(2)分組同體外實驗，每組5只，四組大鼠均注入適量菌液并植入各組相應材料，術后正常飼養(yǎng)，從以下6個方面評價材料抗菌性能:①術后每天觀察大鼠狀態(tài)及患肢情況②術后定期行血白細胞計數檢測。③飼養(yǎng)至2周時對大鼠處死，行X線檢查，觀察比

4、較脛骨影像學變化。④觀察患肢及剖開后脛骨髓腔的大體病理變化。⑤將局部脛骨髓腔組織作組織學染色觀察。⑥各組脛骨髓腔取出的二氧化鈦納米管材料，分別在瓊脂極上進行劃痕細菌培養(yǎng)實驗，培養(yǎng)24h，觀察各組細菌生長情況。
　　結果:1.二氧化鈦納米管抗菌材料制備及相關檢測結果:(1)檢測結果示藥物確定能載入，材料表面PLGA膜覆蓋良好;(2)納米管孔徑由50nm增加至120nm，納米管的藥物負載率從61.0％提高至85.7％，但納米管徑在70

5、nm水平與100nm、120nm水平之間載藥率差異無統(tǒng)計學意義，而納米管徑在50nm、60nm水平與70nm水平載藥率差異有統(tǒng)計學意義;(3)二氧化鈦納米管抗菌材料藥物釋放結果:未覆蓋PLGA膜的載藥Ti02納米管材料藥物完全釋放需8-9天，而覆蓋有PLGA膜的材料藥物完全釋放需30天左右。
　　2.載藥二氧化鈦納米管的體外抗菌性能檢測結果:A組抑菌圈可持續(xù)到接近30天才消失，而B組只能維持到9天左右，C組、D組不能產生抑菌圈。<

6、br>　　3.載藥二氧化鈦納米管的動物體內抗菌性能檢測結果:A組大鼠術后炎癥癥狀較輕，白細胞于術后3天內短暫升高后逐漸降至正常，X線檢查未見明顯骨質破壞，脛骨骨髓腔呈鮮紅色，未見明顯炎性物質，組織切片HE染色也未見明顯炎性細胞浸潤，材料劃痕細菌培養(yǎng)未見細菌生長;而C組及D組術后炎癥癥狀較重，白細胞術后一直升高，X線檢查可見骨質破壞，脛骨骨髓腔可見大量黃色炎性物質，使骨髓腔呈現(xiàn)黃色，組織切片HE染色可見大量炎性細胞浸潤，材料劃痕細菌培養(yǎng)長