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文檔簡介
1、擬南芥花粉發(fā)育過程中,小孢子母細胞減數(shù)分裂產生四分體后發(fā)育為小孢子。小孢子經過不均等的有絲分裂,產生二細胞花粉,二細胞花粉的生殖細胞進一步分裂產生兩個精細胞形成三細胞花粉。人們通過分子遺傳學的研究對這一過程有了較為詳細的理解,但是對某些特定的階段,特別是減數(shù)分裂完成后的細胞周期過程的調控機理仍然不是很清楚。
本研究分離了一個編碼擬南芥蛋白泛素化降解系統(tǒng)F-box蛋白的基因F-box/LRR(FBL)的T-DNA插入突變體。
2、亞歷山大染色表明,該基因的突變導致花粉敗育;配子傳遞效率分析顯示,突變體的雄配子傳遞效率幾乎為零,而突變對雌配子的傳遞效率的影響要小得多,這表明FBL主要影響雄配子體的育性。用DAPI對花粉的染色發(fā)現(xiàn),fbl突變體的花粉發(fā)育停留在單細胞時期,表明fbl突變影響了單細胞花粉向二細胞花粉的轉變過程。
RT-PCR分析顯示FBL在細胞分裂旺盛的愈傷中表達量最高,推測FBL可能通過降解細胞周期的抑制因子而起作用。KRP6是細胞周期
3、蛋白依賴性蛋白激酶的抑制因子,花粉發(fā)育過程中KRP6被泛素化降解是細胞分裂正常進行的必要條件。酵母雙雜交結果表明FBL可能通過其LRR亞基與KRP6相互作用,推測FBL可能通過降解KRP6來解除其對細胞周期的抑制作用。
ASK家族蛋白連接F-box蛋白與Cullinl構成SCF復合體。酵母雙雜交分析發(fā)現(xiàn)FBL可以與ASK家族多個蛋白ASK11、ASK16、ASK18存在相互作用,表明FBL可能通過多個ASK來形成SCFFB
4、L復合體。RHF1a、RHF2a是兩個在PMI中起重要的作用調節(jié)因子,也參與了KRP6的降解。利用細胞周期數(shù)據(jù)庫Cyclbase(www.cyclbase.org)分析了FBL、RHF1a、RHF2a,的表達模式,發(fā)現(xiàn)FBL基因主要在M-G1-S時期表達,而RHF1a/2a則在S-G2-M轉變時期表達。推測FBL與RHF1a/2a可能在細胞周期不同的階段分別降解KRP6。
綜上所述,得出以下結論:在擬南芥的花粉發(fā)育過程中,
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