1、目的：
　　研究巨噬細胞移動抑制因子(Macrophage migration Inhibitory Factor，MIF)表達水平對乳腺癌MCF-7細胞系增殖和遷移、侵襲能力的影響并探討其機制，構建BALB/c鼠移植瘤模型，探究MIF表達水平對BALB/c鼠移植瘤增殖能力和血管生成因子表達水平的影響及機制。
　　方法：
　　1.Cell Counting Kit-8（CCK-8）檢測敲低MIF后MCF-7細胞增殖活力

2、，流式細胞術檢測細胞周期情況，Western blot法檢測敲低MIF后MCF-7細胞Cyclin D1蛋白表達水平。
　　2.劃痕實驗和Transwell實驗檢測敲低MIF對MCF-7細胞遷移和侵襲能力的影響，Western blot法檢測MMP14蛋白表達水平。
　　3.Western blot法檢測下調(diào)因子MIF后，MAPK信號通路中P38、ERK蛋白磷酸化的情況。
　　4.構建BALB/c裸小鼠移植瘤模型，測量

3、腫瘤的體積、繪制腫瘤的生長曲線。
　　5.Western blot法檢測BALB/c鼠移植瘤組織MIF、p-P38和p-ERK蛋白的表達情況。
　　6.免疫組織化學法檢測敲低MIF后裸鼠移植瘤組織CD31和D2-40表達水平，進而評價微血管和微淋巴管數(shù)量。實時熒光定量PCR（Real-time quantitative reverse transcription polymerase chain reaction,Real-

4、time PCR）檢測BALB/c鼠移植瘤組織VEGF-A和VEGF-C的轉(zhuǎn)錄水平，Western blot法檢測VEGF-A和VEGF-C的蛋白翻譯水平。
　　結(jié)果：
　　1.siRNA有效阻斷MCF-7乳腺癌細胞系MIF基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯后，細胞活力受到抑制，細胞周期停滯在G1-S期，Cyclin D1蛋白的表達水平也較MCF-7細胞有所下降。
　　2.MIF表達降低的MCF-7乳腺癌細胞系穿過基底膜（無基質(zhì)膠或有基

5、質(zhì)膠）的細胞數(shù)減少，MMP14蛋白表達水平也隨之下降。
　　3.低表達MIF的MCF-7細胞同時也降低MAPK信號轉(zhuǎn)導通路上p-P38和p-ERK蛋白的磷酸化水平。4.用穩(wěn)定低表達MIF的MCF-7細胞,建立的BALB/c鼠移植瘤模型與MCF-7乳腺癌細胞系建立的移植瘤模型相比較，前者移植瘤的生長較慢，體積較小。
　　5.對低表達MIF細胞建立的BALB/c鼠移植瘤模型p-P38和p-ERK蛋白的磷酸化水平下降。