1、目的：1、檢測siha細胞中是否有HPV16E7基因和HPC2基因表達；2、通過siRNA干擾技術對siha細胞中E7基因和HPC2基因進行沉默，觀察HPV16 E7基因與HPC2基因兩者之間的關系；3、觀察HPC2基因沉默后對siha細胞增殖、凋亡方面的影響。初步探索HPC2基因在HPV16感染的宮頸癌發(fā)病機制中與E7基因之間的聯(lián)系以及HPC2在宮頸癌發(fā)生發(fā)展中可能的機制。
　　方法：1、體外培養(yǎng)HPV16感染的宮頸癌細胞（si

2、ha細胞）；2、應用RT-PCR檢測siha細胞中是否存在E7基因和HPC2基因；3、設計siRNA干擾序列，在siha細胞中分別沉默E7基因和HPC2基因；4、應用RT-PCR和Q-PCR技術檢測siRNA干擾片段對siha細胞中目的基因的沉默效率；5、應用Q-PCR技術檢測沉默E7基因后的siha細胞株中HPC2基因表達情況；6、應用Western-blot檢測沉默E7基因后siha細胞中HPC2蛋白的表達情況；7、應用CCK8檢測

3、HPC2基因沉默后siha細胞的增殖情況；8、應用流式細胞技術檢測HPC2基因沉默后siha細胞的凋亡情況。
　　結果：1、HPV16感染的siha細胞中存在HPVE7基因和HPC2基因；2、通過siRNA干擾技術能有效沉默siha細胞中E7基因（抑制效率：67％左右）和HPC2基因（抑制效率：70%左右）；3、E7基因沉默后的siha細胞中HPC2在mRNA水平和蛋白水平均下調；4、CCK8試驗結果顯示：HPC2基因被沉默后si

4、ha細胞增殖下調，與E7基因沉默后對siha細胞增殖的影響相似；5、細胞凋亡檢測結果顯示：HPC2基因沉默后細胞凋亡比例增加，與E7基因沉默后對siha細胞凋亡的影響相似。
　　結論：1、siha細胞中有HPC2基因和E7基因表達；2、siRNA干擾技術可以有效抑制目的基因的表達；3、E7基因可調控HPC2基因的表達；4、HPC2在siha細胞中參與了增殖、凋亡的調控；5、HPC2對細胞增殖、凋亡的調控可能是HPV16感染細胞后導