痛瀉要方對(duì)腹瀉型腸易激綜合征模型大鼠血清5-HT及VIP含量的影響.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、目的:
  腹瀉型腸易激綜合征(IBS-D)是臨床上常見(jiàn)的胃腸功能紊亂性疾病,中醫(yī)在其辨證論治上獨(dú)具優(yōu)勢(shì)。肝郁脾虛證是常見(jiàn)中醫(yī)證型,采用痛瀉要方治療本病在臨床上應(yīng)用廣泛。目前實(shí)驗(yàn)研究缺乏公認(rèn)的中醫(yī)證型動(dòng)物模型,成功建立中醫(yī)肝郁脾虛證型IBS-D模型是治療該疾病的首要前提;大量的臨床研究已經(jīng)證實(shí)痛瀉要方治療IBS-D有效,但缺乏深入的中醫(yī)理論實(shí)驗(yàn)研究。本研究為中醫(yī)證候模型的制備及痛瀉要方治療IBS-D提供實(shí)驗(yàn)支持,并進(jìn)一步完善腸易激

2、綜合征的理論研究,為臨床治療選藥提供理論和實(shí)驗(yàn)支持。
  方法:
  選用健康SPF級(jí)SD大鼠120只,雌雄各半,8周齡,體重190?10g。適應(yīng)性飼養(yǎng)一周后,隨機(jī)抽取12只(雌雄各半)作為正常組(N);余下大鼠開(kāi)始造模。
  結(jié)合呂紅等、譚潔等描述的造模方法,采用慢性多因素不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激聯(lián)合高脂高糖高熱飲食、高溫高濕環(huán)境建立起接近臨床患者病癥的中醫(yī)肝郁脾虛IBS-D大鼠模型。選用大鼠一般狀態(tài)及體重變化情況、糞便性狀評(píng)

3、分、痛閾值和腸道敏感性、敞箱行為評(píng)分以及糖水偏嗜度作為鑒定模型成功的標(biāo)準(zhǔn)。按照以上四項(xiàng)綜合積分排序,選用符合標(biāo)準(zhǔn)的大鼠隨機(jī)分為模型組(M)、痛瀉要方7天治療組(T7)、雙歧桿菌7天治療組(B7)、痛瀉要方14天治療組(T14)、雙歧桿菌14天治療組(B14),每組12只(雌雄各半)。
  藥物干預(yù):N組、M組,每日均給予同等容量生理鹽水灌胃,連續(xù)14天;T7組給予痛瀉要方水煎液(7.5g/kg.d-1)灌胃,連續(xù)7天;B7組每日給

4、予雙歧桿菌混懸液(2×107 CFU/ml.d-1)灌胃,連續(xù)7天;T14組給予痛瀉要方水煎液(7.5g/kg.d-1)灌胃,連續(xù)14天;B14組每日給予雙歧桿菌混懸液(2×107 CFU/ml.d-1)灌胃,連續(xù)14天。
  樣本取材及處理:治療結(jié)束后,水合氯醛麻醉大鼠,心臟取血,3000r/10min離心取上清液,采用酶聯(lián)免疫法測(cè)試血清5-HT和VIP的含量變化。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中所得數(shù)據(jù)均采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料

5、滿足正態(tài)性分布,所得數(shù)據(jù)采用均數(shù)?標(biāo)準(zhǔn)差(x?s)表示;多組間比較運(yùn)用單因素方差分析,方差齊性組間比較用LSD法,方差不齊時(shí)組間比較用DunnettT3法。
  結(jié)果:
  1、大鼠一般狀態(tài):
  大鼠造模前,其毛色光滑,反應(yīng)迅速敏捷,精神佳,大便正常。造模結(jié)束后,與正常組比較,模型組大鼠毛色欠光澤,甚至有豎毛、活動(dòng)量減少、食欲減退、喜蜷縮、扎堆、反應(yīng)遲緩,大便變軟或不成形,肛門(mén)部或有糞便污物附著等。治療結(jié)束后,與模型

6、組比較,痛瀉藥方組及雙歧桿菌組大鼠一般狀態(tài)均有較大的改善,食欲增強(qiáng)、活動(dòng)力增加、反應(yīng)相對(duì)靈敏,稀便減少或有成型。
  2、體重變化情況:
 ?。?)造模結(jié)束后,與正常組比較,模型組大鼠體重增長(zhǎng)緩慢,體重增長(zhǎng)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.00,p<0.05)。
 ?。?)7天治療結(jié)束后,與正常組比較,模型組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.00,p<0.01),痛瀉要方組及雙歧桿菌組有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.04,0.02,p<0.05);

7、與模型組比較,痛瀉要方組及雙歧桿菌組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。
  (3)14天治療結(jié)束后,與正常組比較,模型組有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.00,p<0.01),痛瀉要方組及雙歧桿菌組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.06,0.07,p>0.05);與模型組比較,痛瀉要方組和雙歧桿菌組體重增長(zhǎng)較快,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.0

8、5)。
  3、大鼠模型鑒定結(jié)果:
 ?。?)造模期間大鼠體重變化:造模14天以后,模型組體重增長(zhǎng)緩慢。與正常組比較,模型組體重開(kāi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.02,p<0.05);造模第28天,與正常組比較,各模型組大鼠體重均有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p=0.00,p<0.01)。
 ?。?)大鼠糞便性狀評(píng)分的變化:造模結(jié)束后,各模型組大鼠糞便性狀積分值顯著高于正常對(duì)照組(p=0.00);與正常對(duì)照組比較,各模型對(duì)照組差異有顯著性統(tǒng)

9、計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
 ?。?)大鼠痛閾值及腸道敏感性變化:造模結(jié)束后,各模型對(duì)照組大鼠痛閾值降低,腸道敏感性增高(p=0.00);與正常對(duì)照組比較,差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。(4)敞箱實(shí)驗(yàn)評(píng)分結(jié)果:造模結(jié)束后,各模型組大鼠敞箱運(yùn)動(dòng)分值降低(p=0.00);與正常組比較,差異有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。
 ?。?)糖水偏嗜度變化:造模結(jié)束后,各模型組大鼠糖水?dāng)z取量降低(p=0.00);與正常組比較

10、,糖水偏嗜度有顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.01)。
  4、大鼠血清5-HT及VIP含量的變化:
 ?。?)7天治療結(jié)束后,各組大鼠血清5-HT、VIP的含量變化:正常組最低,模型組最高。與正常組比較,模型組、痛瀉要方組及雙歧桿菌組5-HT、VIP含量有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.01);與模型組比較,痛瀉要方組及雙歧桿菌組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。
  (2)治

11、療14天結(jié)束后,各組大鼠血清5-HT、VIP含量變化:模型組最高,痛瀉要方組和雙歧桿菌組接近正常組。與正常組比較,模型組5-HT、VIP含量有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p<0.01);與模型組比較,雙歧桿菌組和痛瀉要方組血清5-HT、VIP含量降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.05);與痛瀉要方組比較,雙歧桿菌組無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05)。
  結(jié)論:
  1、慢性輕度不可預(yù)見(jiàn)性應(yīng)激聯(lián)合高脂高糖高熱飲食、高溫高濕環(huán)境同步造??梢越?/p>

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