1、目的:本實(shí)驗(yàn)通過(guò)高糖高脂飼料飼養(yǎng)聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)腹腔注射建立糖尿病(DM)大鼠動(dòng)物模型，應(yīng)用泄?jié)峤舛?、活血通絡(luò)方、厄貝沙坦及兩者聯(lián)用進(jìn)行干預(yù)治療，通過(guò)觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物一般情況、各項(xiàng)生化指標(biāo)、腎臟病理形態(tài)學(xué)變化以及腎組織中血管生成素樣蛋白2(Angiopoietin-like protein2，Angptl2)的表達(dá)水平，來(lái)探討泄?jié)峤舛?、活血通絡(luò)方保護(hù)DN大鼠腎臟的可能作用機(jī)制。
　　方法:健

2、康雄性Sprague-Dauley大鼠85只，體重170±10g，適應(yīng)性的飼養(yǎng)一周。隨機(jī)選出15只為正常組(NG)，給予普通的飼料喂養(yǎng)。其余70只大鼠給予高糖高脂飼料喂養(yǎng)，12周后給予一次性的腹腔注射STZ35mg/kg，正常組大鼠給予相當(dāng)劑量的0.1mol/L枸櫞酸緩沖液一次性腹腔注射。72小時(shí)后測(cè)隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L，為DM造模成功，在造模過(guò)程中死亡2只，血糖不達(dá)標(biāo)1只，都予以剔除。將造模成功的大鼠隨機(jī)分為4組:模型組(M

3、G)17只、中藥組(ZG)17只、西藥組(XG)17只、中藥加西藥組(JG)16只。正常組與模型組大鼠給予相當(dāng)劑量的生理鹽水灌胃，各治療組大鼠給予相應(yīng)的藥物灌胃。于給藥期間的第4周、8周、12周監(jiān)測(cè)體重、血糖及尿蛋白。第16周末，禁食12小時(shí)，不禁水，收集24小時(shí)尿液，檢測(cè)24小時(shí)尿蛋白定量，稱量體重，10％水合氯醛麻醉動(dòng)物，腹主動(dòng)脈取血檢測(cè)各項(xiàng)生化指標(biāo)，留取腎臟標(biāo)本，用于光鏡、電鏡下觀察腎臟病理形態(tài)學(xué)變化，Angptl2 mRNA含量

4、的檢測(cè)及免疫組化中Angptl2的表達(dá)。
　　結(jié)果:
　　1實(shí)驗(yàn)大鼠的一般情況
　　正常組大鼠精神狀態(tài)良好，飲食正常，毛色光澤，反應(yīng)靈敏體重逐漸增加。造模組大鼠均出現(xiàn)多飲、多食、多尿、精神萎靡、毛色黯淡、倦怠少動(dòng)、肌肉瘦削等癥狀，其中以模型組的癥狀嚴(yán)重。在實(shí)驗(yàn)造模的過(guò)程中，注射STZ72小時(shí)內(nèi)大鼠死亡2只，血糖不達(dá)標(biāo)1只，予以剔除;在給藥的過(guò)程中，模型組死亡4只，中藥組死亡1只，西藥組死亡2只，予以剔除;中藥組2只，西

5、藥組1只，中藥+西藥1只血糖緩解，予以剔除。
　　2各組大鼠BW、KW、HI（右腎重/體重）的比較
　　與正常組比較，模型組及各治療組的體重均明顯減輕（P＜0.05）;模型組及各治療組之間體重?zé)o明顯差別(P＞0.05）。與正常組比較，模型組及各治療組的肥大指數(shù)均明顯升高（P＜0.05）;模型組及各治療組之間肥大指數(shù)比較無(wú)明顯差別(P＞0.05）。各組右腎重比較無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　3各組大鼠24UTP的比較

6、
　　與正常組相比，各治療組與模型組的24hUTP均明顯增多(P＜0.05);與模型組相比，各治療組的24hUTP均明顯減少（P＜0.05）;各治療組之間相比，中藥加西藥組低于中藥組、西藥組(P＜0.05);中藥組與西藥組比較無(wú)明顯差異(P＞0.05）。
　　4各組大鼠HbA1c的比較
　　與正常組相比，造模各組的HbA1c明顯升高（P＜0.05）;模型組與西藥組高于中藥組與中藥+西藥組（P＜0.05）;模型組與西藥組

7、之間無(wú)明顯差別(P＞0.05）;中藥組與中藥+西藥組之間無(wú)明顯差別（P＞0.05）。
　　5各組大鼠TC、TG的比較
　　與正常組比較，各治療組及模型組TC和TG水平明顯升高（P＜0.05）;與模型組比較，各治療組TC、TG明顯降低(P＜0.05);各治療組之間比較，中藥+西藥組TC、TG低于中藥組、西藥組（P＜0.05）;中藥組與西藥組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　6各組大鼠TP、ALB的比較
　　與

8、正常組相比，模型組與各治療組TP和ALB水平均顯著降低(P＞0.05）;與模型組相比，各治療組均升高（P＜0.05）;各治療之間相比，中藥+西藥組高于中藥組、西藥組(P＜0.05);中藥組、西藥組之間無(wú)明顯差異(P＞0.05）。
　　7各組大鼠BUN、Scr的比較
　　正常組、模型組、中藥組、西藥組、中藥+西藥組BUN、Scr之間相比無(wú)明顯差異(P＞0.05)。
　　8腎臟病理形態(tài)學(xué)觀察
　　8.1光鏡觀察

9、>　　正常組大鼠腎臟組織結(jié)構(gòu)清晰正常，腎小球結(jié)構(gòu)未見(jiàn)異常，腎小球毛細(xì)血管基底膜、系膜基質(zhì)正常無(wú)增厚;模型組大鼠腎臟腎小球明顯肥大，腎小球毛細(xì)血管基底膜、系膜基質(zhì)增厚，系膜細(xì)胞增生，足突融合。與模型組相比，各治療組腎臟病理改變明顯減輕。
　　8.2電鏡觀察
　　正常組大鼠腎臟組織結(jié)構(gòu)清晰正常，腎小球毛細(xì)血管基底膜無(wú)增厚，足細(xì)胞足突排列整齊，未見(jiàn)融合;模型組大鼠腎臟可見(jiàn)腎小球毛細(xì)血管基底膜明顯增厚且不均勻，系膜基質(zhì)增多，足突廣泛

10、融合;各治療組的病理改變較模型組減輕，各治療組間無(wú)明顯差別。
　　9免疫組織化學(xué)法檢測(cè)腎組織Angptl2的表達(dá)
　　正常組在腎小球有少量Angptl2表達(dá)或未見(jiàn)明顯表達(dá);與正常組相比，造模組大鼠腎小球中Angptl2的表達(dá)量明顯增加(P＜0.05);與模型組相比，各治療組Angptl2的表達(dá)量明顯減少(P＜0.05);與中藥組、西藥組相比，中藥+西藥組Angptl2的表達(dá)量減少(P＜0.05）;中藥組與西藥組之間Angpt

11、l2的表達(dá)量無(wú)明顯差異（P＞0.05）。
　　10 Real-Time PCR檢測(cè)腎組織Angptl2 mRNA的表達(dá)
　　與正常組相比，模型組和各治療組大鼠Angptl2 mRNA表達(dá)量均明顯增加(P＜0.05）;與模型組相比，各治療組Angptl2mRNA表達(dá)量明顯減少(P＜0.05);各治療組之間相比，中藥+西藥組Angptl2的表達(dá)量少于中藥組及西藥組(P＜0.05);中藥組與西藥組之間Angptl2的表達(dá)量無(wú)明顯差