1、本文主要從以下幾方面進(jìn)行了論述：
　　第一部分 丹參酮ⅡA對(duì)人羊膜上皮WISH細(xì)胞水通透性的影響
　　目的:探討丹參酮ⅡA對(duì)人羊膜上皮WISH細(xì)胞水通透性的影響。
　　方法:CCK-8方法檢測(cè)丹參酮ⅡA對(duì)人羊膜上皮WISH細(xì)胞增殖活力的影響，倒置顯微鏡下觀察丹參酮ⅡA作用前后細(xì)胞大小的變化，電鏡觀察細(xì)胞中各細(xì)胞器的變化。
　　結(jié)果:檢測(cè)不同濃度（0μ mol/L，5μ mol/L，10μ mol/L，50μ mo

2、l/L，100μ mol/L，150μ mol/L，200μ mol/L）丹參酮ⅡA對(duì)人羊膜上皮WISH細(xì)胞增殖活力的影響，得到IC50濃度為35μ mol/L;應(yīng)用IPP軟件分析細(xì)胞人小發(fā)現(xiàn)，與空白對(duì)照組相比，35μ mol/L丹參酮ⅡA處理人羊膜上皮WISH細(xì)胞24h，細(xì)胞明顯變大，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）;電鏡下觀察到:與空白對(duì)照組相比，35μ mol/L丹參酮ⅡA孵育人羊膜上皮WISH細(xì)胞24h，細(xì)胞腫脹，細(xì)胞膜微絨毛水

3、腫增粗，包膜界限欠清晰;細(xì)胞胞質(zhì)由致密變疏松，出現(xiàn)部分溶解現(xiàn)象，同時(shí)核糖體增加;細(xì)胞核膜水腫，間隙增大，線(xiàn)粒體腫脹，出現(xiàn)空泡，由致密變疏松;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張變圓變大，空泡增多，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)變光滑，部分脫顆?，F(xiàn)象。
　　結(jié)論:丹參酮ⅡA增加了人羊膜上皮WISH細(xì)胞對(duì)水的通透性。
　　第二部分 丹參酮ⅡA調(diào)節(jié)人羊膜上皮WISH細(xì)胞中水通道蛋白表達(dá)的研究
　　目的:探討AQP1、AQP3、AQP8、AQP9在人羊膜上皮WISH細(xì)胞的

4、表達(dá)，探討丹參酮]ⅡA對(duì)人羊膜上皮WISH細(xì)胞中AQP1、AQP3、AQP8、AQP9表達(dá)的影響。
　　方法:免疫細(xì)胞化學(xué)染色方法檢測(cè)人羊膜上皮WISH細(xì)胞中AQPs的定位，免疫印跡方法檢測(cè)細(xì)胞中AQP1、AQP3、AQP8、AQP9蛋白的表達(dá)。檢測(cè)不同濃度(0μ mol/L，5μ mol/L，20μ mol/L，35μ mol/L，50μ mol/L，65μ mol/L)丹參酮ⅡA作用不同時(shí)間(0h，6h，12h，24h，48h

5、)人羊膜上皮WISH細(xì)胞中AQP1、AQP3、AQP8、AQP9蛋白表達(dá)的變化。
　　結(jié)果:免疫細(xì)胞化學(xué)染色結(jié)果顯示AQP1、AQP3、AQP8、AQP9主要表達(dá)在人羊膜上皮WISH細(xì)胞的胞漿中。丹參酮Ⅱ A上調(diào)了人羊膜上皮WISH細(xì)胞中AQP1、AQP3、AQP8、AQP9蛋白的表達(dá)，上調(diào)AQP1、AQP3蛋白表達(dá)最顯著的丹參酮ⅡA濃度是35μ mol/L，上調(diào)AQP8、AQP9蛋白表達(dá)最顯著的丹參酮ⅡA濃度是5μ mol/L，

6、35μ mol/L的丹參酮ⅡA上調(diào)AQP1、AQP3蛋白表達(dá)最顯著時(shí)間為24h，5μ mol/L的丹參酮ⅡA上調(diào)AQP8、AQP9表達(dá)最顯著的時(shí)間為24h。
　　結(jié)論:丹參酮ⅡA上調(diào)了人羊膜上皮WISH細(xì)胞中 AQP1、AQP3、AQP8、AQP9蛋白的表達(dá)，不同濃度的丹參酮ⅡA上調(diào)的水通道蛋白不同，在不同時(shí)間點(diǎn)上調(diào)的水通道蛋白也不同，四種水通道蛋白之間可能存在相互代償。
　　第三部分 丹參酮ⅡA調(diào)節(jié)人羊膜上皮WISH細(xì)胞中

7、AQPs表達(dá)的MAPK相關(guān)信號(hào)通路研究
　　目的:探討丹參酮ⅡA調(diào)節(jié)人羊膜上皮WISH細(xì)胞中AQPs表達(dá)的MAPK相關(guān)信號(hào)通路。
　　方法:35μ mol/L和5μ mol/L丹參酮ⅡA作用人羊膜上皮WISH細(xì)胞24h，通過(guò)MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抗體芯片，篩查相關(guān)的MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白。應(yīng)用siRNA干擾技術(shù)和抑制劑下調(diào)得到的相關(guān)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白，將細(xì)胞分成四組:空白對(duì)照組;siRNA組（抑制劑組）;丹參酮ⅡA組;siRN

8、A（抑制劑）+丹參酮ⅡA組，應(yīng)用免疫印跡方法檢測(cè)AQP1、AQP3、AQP8、AQP9及MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白的表達(dá)，觀察該通路對(duì)丹參酮ⅡA調(diào)節(jié)人羊膜上皮WISH細(xì)胞中AQP1、AQP3、AQP8、AQP9蛋白表達(dá)的影響。
　　結(jié)果:通過(guò)MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路抗體芯片檢測(cè)，篩查出丹參酮ⅡA作用細(xì)胞相關(guān)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白為糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)。應(yīng)用GSK3β-siRNA、GSK-3β的抑制劑LiCl進(jìn)一步證實(shí)丹參酮Ⅱ