1、本研究以上海海洋大學分離自患出血敗血病的雜交鱘的豚鼠氣單胞菌XL2-T為實驗菌株，以三個不同地域、來源的豚鼠氣單胞菌株為對照，對其進行了相關細菌學(Bacteriology)、病原學(Pathology)研究和(端生)單鞭毛(Single Polar flagella)蛋白A(flagellinA簡稱FlaA)基因(flaA)的克隆和原核與真核表達。為今后豚鼠氣單胞菌亞單位基因工程疫苗開發(fā)和在水產上的應用進行了有益的探索。 參

2、照相關文獻，應用報道引物擴增了不同豚鼠氣單胞菌flaA基因糖基化核心序列，經分析，近N端氨基酸序列均為NAQRNLM：近C端均為QANQRC極為保守，中間為糖基化可變區(qū)。查閱Genebank，將公布的相關豚鼠氣單胞菌鞭毛基因應用megalign采用CLUSTAL"W"method進行alignment，設計簡并引物，擴增得到flaA序列全長，構建了原核重組表達載體pET-28a+flaA和畢赤酵母(Pichia pastoris)分泌型

3、重組表達載體pPIC9K+flaA。 將重組表達載體pET-28a+flaA轉化大腸桿菌BL21(DE3)誘導表達重組蛋白，并免疫新西蘭兔制備抗血清，進行了效價測定及細菌凝集試驗。 將重組pPIC9K+flaA應用限制性內切酶BglII和SacI，在不同位點線性化，采用電轉化法轉化畢赤酵母GS115，構建MutS和Mut+重組表達菌株。應用真核細胞誘導表達原核FlaA結構蛋白。 研究了豚鼠氣單胞菌(Arom

4、onas caviae)的適用培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件及保存條件、菌落與細菌形態(tài)學、細菌生理生化鑒定、16SrDNA分子鑒定、運動性檢測、相關毒力檢測、藥物敏感性檢測，研究的側重點為細菌鞭毛相關研究，包括鞭毛染色(silver stain和Lefison stain)、端生和側生鞭毛(polar and lateral flagella)的提取，應用自制兔抗重組FlaA血清(anti-rcFlaA)進行了鞭毛蛋白(flagella)蛋白質印跡和