1、目的：通過(guò)建立大鼠慢性硫酸錳染毒模型，觀察大鼠血漿氧化應(yīng)激指標(biāo)及Hsp70含量的變化，同時(shí)觀察海馬組織凋亡相關(guān)基因和Hsp70基因表達(dá)的變化、海馬組織PI3K/Akt信號(hào)通路相關(guān)蛋白表達(dá)及磷酸化的改變以及Hsp70蛋白的表達(dá)量，研究MnSO4誘發(fā)神經(jīng)凋亡可能的機(jī)制以及對(duì)PI3K/Akt信號(hào)通路的影響，并探討Hsp70作為慢性錳中毒的生物標(biāo)志物的可行性。
　　方法：選擇健康雄性SPF級(jí)SD大鼠40只，隨機(jī)分成四組：空白對(duì)照組、低劑量

2、組（5mg/kg）、中劑量組（10mg/kg）、高劑量組（20mg/kg），每組10只，分籠飼養(yǎng)，自由飲水、攝食。分別腹腔注射生理鹽水、5、10、20 mg/kg的MnSO4?H2O溶液染毒24周，每周五次，周末休息兩天。在染毒第24周后頸椎脫臼處死大鼠，收集大鼠生物樣本并稱重，計(jì)算臟器系數(shù)；使用南京建成生物工程研究所試劑盒檢測(cè)大鼠血漿SOD、GSH-Px、CAT及MDA水平，ELISA試劑盒檢測(cè)血漿Hsp70含量；分離大鼠海馬組織，熒

3、光定量PCR法測(cè)定海馬組織Caspase-3、Bcl-2、Bax、Akt-1、FoxO3a、Hsp70 mRNA表達(dá)水平，Western Blot法測(cè)定Hsp70蛋白表達(dá)及Akt蛋白表達(dá)及其磷酸化水平。
　　結(jié)果：
　　（1）隨著染錳濃度的增加，大鼠心臟、肝臟、脾臟、肺臟及腎臟臟器系數(shù)均隨之升高，睪丸臟器系數(shù)隨之明顯下降。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，高劑量組大鼠肝臟、脾臟、肺臟及腎臟臟器系數(shù)均顯著高于對(duì)照組與低劑量組（P<0.05），心臟

4、系數(shù)顯著低于中劑量組（P<0.05），睪丸臟器系數(shù)顯著低于其余三組（P<0.05）；中劑量組及低劑量組大鼠脾臟臟器系數(shù)顯著高于對(duì)照組（P<0.05）。
　?。?）慢性硫酸錳染毒大鼠高劑量組血漿SOD、GSH-Px及CAT活力分別為(135.46±35.41) U/ml、(845.81±26.06) U及(3.06±0.42) U/ml，均顯著低于對(duì)照組（P<0.01）及低劑量組（P<0.05）。高劑量組大鼠血漿MDA濃度為(3.0

5、5±0.37) nmol/L，顯著高于對(duì)照組的(2.53±0.21) nmol/L（P<0.01）及低劑量組的(2.61±0.35) nmol/L（P<0.05）。高劑量組染毒大鼠血漿Hsp70含量為(1020.50±134.86) ng/ml，顯著高于對(duì)照組的(807.15±160.23) ng/ml（P<0.05）及低劑量組的(830.64±161.02) ng/ml（P<0.05）。
　?。?）大鼠海馬組織Akt-1、Fox

6、O3a mRNA表達(dá)量隨染毒劑量增加而降低（P<0.05）；高劑量組Hsp70 mRNA表達(dá)量顯著高于對(duì)照組、低劑量組及中劑量組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。高劑量組caspase-3及Bcl-2 mRNA表達(dá)量顯著低于低劑量組（P<0.05），但Bax mRNA表達(dá)量則顯著高于對(duì)照組及低劑量組（P<0.05）。
　?。?）Western Blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，隨著硫酸錳染毒劑量增加，各組間海馬Akt蛋白表達(dá)量無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差

7、異（P>0.05），但Akt（pS473）表達(dá)量呈上升趨勢(shì)（P<0.05）。隨著硫酸錳染毒劑量增加，海馬Hsp70蛋白含量呈增加趨勢(shì)，高劑量組Hsp70蛋白含量顯著高于對(duì)照組（P<0.05）與低劑量組（P<0.05）。
　?。?）Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，大鼠血漿Hsp70含量與血漿SOD、CAT以及GSH-Px活力呈負(fù)相關(guān)性，相關(guān)系數(shù)分別為r1=-0.4439，r2=-0.4516，r3=-0.5226，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)

8、意義（P<0.05）；血漿Hsp70含量與血漿MDA含量呈顯著正相關(guān)性（r4=0.4785，P<0.05）。血漿Hsp70含量與海馬組織Hsp70蛋白表達(dá)量成正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為r5=0.7415（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　?。?）慢性MnSO4染毒可能通過(guò)引起大鼠體內(nèi)抗氧化能力下降，脂質(zhì)過(guò)氧化水平升高，從而造成中樞神經(jīng)細(xì)胞損傷及凋亡增加。
　　（2）慢性MnSO4染毒可以激活大鼠海馬PI3K/Akt通路，促進(jìn)Ak