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文檔簡介
1、目的:
研究兔腰椎間盤髓核內注射慢病毒攜帶的BMP-2和細胞分化抑制因子1(inhibitor of differentiation1,Id1)基因能否有效改善椎間盤退變進程。
方法:
?、沤浉菇⑼醚甸g盤細針穿刺退變模型,并在影像學和組織學上加以驗證;⑵取3月齡新西蘭兔32只,體質量2.0~2.5 kg;以L3/4、L4/5、L5/6為目標椎間盤,經腹細針穿刺法制造椎間盤退變模型。將30只造模成功的實驗動
2、物隨機分為5組,每組6只;造模后4周于各組目標椎間盤中分別注射 Lv-BMP-2病毒(A組)、Lv-BMP-2+Lv-Id1病毒(B組)、Lv-Id1病毒(C組)、Lv-綠色熒光蛋白空載體病毒(D組)及PBS(E組)。于注射后2、4、8周各組分別隨機取2只動物行 T2-mapping MRI檢查獲得確切的 T2弛豫時間(T2值);之后處死動物取椎間盤組織,應用實時熒光定量PCR、ELISA法檢測Ⅱ型膠原及蛋白聚糖的 mRNA相對表達量及
3、含量。
結果:
?、偈中g操作本身對兔子的體質量無明顯影響,僅一只兔子發(fā)現(xiàn)腹壁與腸管輕度部分粘連;術后證實出穿刺的椎間盤為目標椎間盤,其椎間盤高度指數和MRI信號強度呈進行性退變改變;穿刺后4周組織學表現(xiàn)為髓核區(qū)域脊索細胞顯著減少而纖維細胞增生,纖維環(huán)結構紊亂。②T2-mapping MRI檢查示,注射后0、2周各組間 T2值比較差異均無統(tǒng)計學意義(P>0.05);注射后4周,A、B組 T2值顯著高于 C、D、E組(P<
4、0.05),A、B組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05);注射后8周,B組 T2值顯著高于其余各組(P<0.05)。實時熒光定量 PCR及 ELISA檢測示,注射后2、4、8周 B組Ⅱ型膠原及蛋白聚糖的 mRNA相對表達量及含量均顯著高于其余各組(P<0.05)。
結論:
⑴經腹纖維環(huán)細針穿刺法,操作簡單,目標椎間盤定位準確,手術視野更佳,椎間盤退變程度一致,并發(fā)癥少;而且在影像學和組織學上符合人腰椎間盤退變情況;
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