1、研究背景:
　　鼻咽癌是一種來源于鼻咽部的惡性腫瘤，好發(fā)于我國的南方以及東南亞地區(qū)。目前認(rèn)為鼻咽癌的病因是EB病毒、基因以及環(huán)境因素的相互作用，其發(fā)病是多步驟且復(fù)雜的過程。根據(jù)WHO的病理分型，鼻咽癌主要分為:非角化癌、角化型鱗狀細(xì)胞癌以及基底樣鱗狀細(xì)胞癌。鼻咽癌具有早期淋巴轉(zhuǎn)移的特點(diǎn)。對于無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的鼻咽癌，主要采取以放射治療為主的綜合治療手段。遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移是目前鼻咽癌治療失敗的主要原因。探索鼻咽癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制，尋找可靠的抑制腫瘤轉(zhuǎn)移

2、的靶點(diǎn)，是目前鼻咽癌轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。在前期研究中，本課題組發(fā)現(xiàn)鼻咽癌細(xì)胞中存在脂肪滴堆積現(xiàn)象，提示鼻咽癌細(xì)胞中的脂肪酸代謝可能存在異常，并參與鼻咽癌的發(fā)生與發(fā)展。脂肪酸代謝改變與腫瘤的關(guān)系尚未闡明。目前鼻咽癌脂肪酸代謝及其相關(guān)基因改變的文獻(xiàn)報(bào)道非常有限。
　　目的:篩選出鼻咽癌中異常表達(dá)的脂肪酸代謝相關(guān)基因并進(jìn)一步研究其對鼻咽癌惡性生物行為的影響極其可能的分子機(jī)制。
　　研究方法:
　　1.通過對NCBI下屬的

3、GEO數(shù)據(jù)庫中兩組鼻咽癌表達(dá)譜芯片數(shù)據(jù)進(jìn)行生物信息學(xué)分析，篩選出鼻咽癌中與脂肪酸代謝相關(guān)的差異基因。
　　2.利用TCGA數(shù)據(jù)庫，分析ACAA1基因在人類多種腫瘤中的表達(dá)改變。
　　3.通過熒光定量PCR、Western blot法及免疫組織化學(xué)染色法驗(yàn)證ACAA1在鼻咽癌中的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)情況。
　　4.構(gòu)建穩(wěn)定過表達(dá)ACAA1的鼻咽癌細(xì)胞系，通過繪制生長曲線、克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞遷移試驗(yàn)以及體外細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)來檢測ACAA

4、1基因在鼻咽癌細(xì)胞中的腫瘤生物學(xué)功能。
　　5.利用Western blot方法檢測PTEN、Akt/pAkt以及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化相關(guān)因子Snail、MMP9、MMP2、E-cadherin的表達(dá)情況，并進(jìn)一步利用PTEN抑制劑phen處理過表達(dá)ACAA1的鼻咽癌細(xì)胞，檢測ACAA1是否通過PTEN/Akt信號傳導(dǎo)通路影響鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。
　　研究結(jié)果:
　　1.發(fā)現(xiàn)脂肪酸代謝相關(guān)基因ACAA1在鼻咽癌和10種腫瘤中低

5、表達(dá)生物信息學(xué)分析發(fā)現(xiàn)脂肪酸代謝相關(guān)基因ACAA1在鼻咽癌和頭頸部鱗狀細(xì)胞癌、肺癌、肝癌等10種惡性中低表達(dá);進(jìn)一步通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR和免疫組織化學(xué)染色法驗(yàn)證了ACAA1在鼻咽癌中轉(zhuǎn)錄和表達(dá)的下調(diào)，進(jìn)一步驗(yàn)證了生物信息學(xué)分析結(jié)果的可靠性。
　　2.ACAA1抑制鼻咽癌細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為
　　ACAA1可抑制鼻咽癌細(xì)胞的增殖、克隆形成、細(xì)胞遷移以及侵襲能力。
　　提示ACAA1抑制鼻咽癌細(xì)胞的惡性生物學(xué)行為

6、　　3.ACAA1抑制鼻咽癌細(xì)胞的上皮間-質(zhì)轉(zhuǎn)化
　　轉(zhuǎn)染ACAA1基因的鼻咽癌上皮細(xì)胞中Snail、MMP9、MMP2表達(dá)下調(diào)，而E-cadherin表達(dá)上調(diào)，提示ACAA1抑制鼻咽癌細(xì)胞的上皮間-質(zhì)轉(zhuǎn)化。
　　4.ACAA1通過PTEN/Akt/EMT途徑抑制鼻咽癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移
　　過表達(dá)ACAA1的鼻咽癌細(xì)胞中PTEN表達(dá)增高，而且Akt的磷酸化水平下降;PTEN抑制劑phen處理可促進(jìn)過表達(dá)ACAA1鼻咽癌細(xì)胞的