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文檔簡(jiǎn)介
1、植物磷轉(zhuǎn)運(yùn)體轉(zhuǎn)錄后調(diào)控(從內(nèi)質(zhì)網(wǎng)(ER)到細(xì)胞質(zhì)膜(PM))受到磷酸鹽轉(zhuǎn)運(yùn)體運(yùn)輸協(xié)助因子PHF1蛋白的調(diào)控。水稻OsPHF1基因也已被克隆。前期研究表明,超表達(dá)OsPHF1可以增強(qiáng)水稻磷吸收能力。本研究利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)基因方法,通過(guò)構(gòu)建雙價(jià)T-DNA載體將超表達(dá)OsPHF1導(dǎo)入到秈稻超級(jí)雜交稻恢復(fù)系9311。通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)基因材料的篩選、分子生物學(xué)鑒定,生理測(cè)定與田間試驗(yàn),得到以下結(jié)果:
1、采用PCR、RT-PCR、Sout
2、hernBlot等分子生物學(xué)方法對(duì)T0代轉(zhuǎn)基因材料進(jìn)行鑒定,并用兩個(gè)OsPHF1超表達(dá)轉(zhuǎn)基因獨(dú)立株系進(jìn)行生理與田間條件分析。
2、在正常供磷溶液培養(yǎng)條件下,對(duì)T1代OsPHF1基因超表達(dá)株系葉片及根有效磷含量的測(cè)定和33P吸收動(dòng)力學(xué)分析。結(jié)果表明,對(duì)比野生型親本,OsPHF1超表達(dá)株系有效磷含量及磷吸收能力顯著提高。
3、T2代兩個(gè)OsPHF1基因超表達(dá)株系在海南實(shí)驗(yàn)基地田間試驗(yàn)表明,在不施磷肥條件下,轉(zhuǎn)基因
3、植株的有效穗數(shù)、生物量、產(chǎn)量較野生型均有顯著提高。對(duì)供試轉(zhuǎn)基因材料總磷含量的測(cè)定表明,兩個(gè)OsPHF1基因超表達(dá)株系總磷含量較野生型均顯著升高。
4、T3代兩個(gè)OsPHF1基因超表達(dá)株系在浙江長(zhǎng)興實(shí)驗(yàn)基地田間試驗(yàn)表明,低磷(不施磷肥)和中磷(施磷肥:225公斤過(guò)磷酸鈣/公頃)條件下,兩個(gè)OsPHF1基因超表達(dá)株系的有效穗、生物量和產(chǎn)量較野生型均有顯著提高,正常供磷條件下(正常施磷肥:450公斤過(guò)磷酸鈣/公頃)差異不顯著。低
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