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文檔簡介
1、目的:探討內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)前后肝癌細胞中蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)的表達水平及PDI過表達對肝癌細胞遷移能力的影響。
方法:取培養(yǎng)的第3代人正常肝細胞株LO-2、肝癌細胞株HepG2和高轉(zhuǎn)移能力肝癌細胞株SMMC-7721,采用150 mmol/L無水乙醇處理48 h誘導(dǎo)發(fā)生ERS;采用Western blot方法檢測無水乙醇處理前后葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78(GRP78)、生長停滯及DNA損傷誘導(dǎo)基因153( CHOP)、X-
2、盒-結(jié)合蛋白-1( XBP-1)及PDI的表達水平;用特異性LV-PDIA2(9923-1)病毒轉(zhuǎn)染3種細胞,觀察PDI過表達對肝癌細胞遷移能力的影響。
結(jié)果:無水乙醇處理48h,在HepG2及LO2細胞中GRP78表達上調(diào),而SMMC-7721細胞中GRP78表達下調(diào),分別與無水乙醇處理前比較,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。在無水乙醇處理48h,LO2及SMMC-7721細胞中CHOP表達上調(diào),分別與無水乙醇處理前比較,P<0
3、.05,有統(tǒng)計學(xué)意義;而在無水乙醇處理前后,HepG2細胞中均無CHOP表達。在無水乙醇處理48h,3種細胞中XBP-1均上調(diào),LO2細胞與無水乙醇處理前比較,P>0.05,無統(tǒng)計學(xué)意義;HepG2及SMMC-7721細胞中XBP-1與無水乙醇處理前比較,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。無水乙醇處理前,細胞中PDI的表達水平從高到低為SMMC-7721細胞、LO2細胞、HepG2細胞,3種細胞比較P<0.001;無水乙醇處理48h,3種細胞
4、的PDI表達水平均下調(diào),分別與無水乙醇處理前比較,P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義。轉(zhuǎn)染LV-PDIA2(9923-1)病毒前, HepG2細胞遷移能力最弱,其次為LO2細胞,遷移能力最強的為SMMC-7721細胞;轉(zhuǎn)染LV-PDIA2(9923-1)病毒使PDI過表達后,HepG2細胞遷移能力最弱,其次為LO2細胞,遷移能力最強的為SMMC-7721細胞,3種細胞比較P<0.05,有統(tǒng)計學(xué)意義;與病毒轉(zhuǎn)染前比較,LO2細胞的遷移能力降低(P
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