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文檔簡介
1、得克隆(Dechlorane Plus,DP)是一種使用量巨大、廣泛地存在于各種環(huán)境和生物介質(zhì)、具有生物富集性的氯代阻燃劑。DP的毒理效應(yīng)及作用機制研究非常有限。本課題組前期研究發(fā)現(xiàn),DP可誘導(dǎo)人乳腺癌細胞MCF-7的增殖,并對雌激素受體及MAPK/ERK通路相關(guān)基因的表達產(chǎn)生影響。本論文采用蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法,對DP暴露后的MCF-7細胞的蛋白表達譜進行分析,進一步挖掘DP毒性效應(yīng)及內(nèi)分泌干擾作用的可能分子機制,為DP生物毒性和生態(tài)
2、風險的評價提供科學(xué)依據(jù)。
差異蛋白質(zhì)組分析表明,10-6M DP暴露處理96小時后的MCF-7細胞與對照組相比,蛋白表達譜發(fā)生明顯改變,共獲得52個差異表達(≥1.5倍)的蛋白點。經(jīng)統(tǒng)計學(xué)分析后,共23個蛋白點具有顯著性差異(p≤0.05)。其中,表達上調(diào)的蛋白點14個,表達下調(diào)的蛋白點9個。選取上述23個蛋白點進行MALDI-TOFMS/MS串聯(lián)質(zhì)譜分析,鑒定出其中的10個蛋白點。這些蛋白點分別為熱休克蛋白27和60、堿性肌
3、球蛋白輕鏈的兩個異構(gòu)體、核糖核苷二磷酸激酶B、60S酸性核糖體蛋白P2、肽酰脯氨基順反異構(gòu)酶A、前纖維蛋白-1、鳥嘌呤核苷酸交換因子5和原鈣黏蛋白α9前體。進一步的生物信息學(xué)分析顯示這10個蛋白主要參與了細胞過程、生物學(xué)調(diào)控、對外源刺激的響應(yīng)、代謝和發(fā)育過程、以及信號和免疫等生物學(xué)過程。選取熱休克蛋白60進行了mRNA和蛋白水平的定量分析,其在DP暴露處理后的變化趨勢與蛋白質(zhì)組分析的結(jié)果一致,說明本研究發(fā)現(xiàn)的差異表達蛋白質(zhì)可用于后續(xù)DP
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