產(chǎn)CLA乳酸菌的篩選鑒定及LAI酶動(dòng)力學(xué)研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本試驗(yàn)圍繞如何開(kāi)發(fā)有保健功能的乳酸菌,以自家釀制的酸菜汁為試驗(yàn)原料,以傳統(tǒng)分離細(xì)菌的方法,通過(guò)革蘭氏染色初步鑒定后,通過(guò) PCR擴(kuò)增16SrDNA片段并將之與T-載體連接轉(zhuǎn)化后序列分析,確定菌種,結(jié)果表明該菌種為棒狀乳桿菌,通過(guò)紫外法分析可知其產(chǎn)生的共軛亞油酸的含量0.0107mg/ml,共軛亞油酸轉(zhuǎn)化率為2.51%。
  首先通過(guò)50%飽和硫酸銨對(duì)棒狀乳桿菌亞油酸異構(gòu)酶進(jìn)行分離純化,其回收率為65.57%,純化倍數(shù)為1.15,再

2、經(jīng)80%飽和硫酸銨鹽析其回收率為44.62%,純化倍數(shù)為3.73,最后經(jīng)過(guò)Sephadex G-100凝膠過(guò)濾層析亞油酸異構(gòu)酶的回收率為10.32%,純化倍數(shù)為8.36。
  對(duì)產(chǎn)共軛亞油酸棒狀乳桿菌從培養(yǎng)溫度,培養(yǎng)時(shí)間,pH值和接種量四個(gè)因素方面進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn),確定棒狀乳桿菌產(chǎn)共軛亞油酸最佳培養(yǎng)溫度為36℃,最佳培養(yǎng)時(shí)間為36h,最佳pH值為5,最佳接種量為4%;設(shè)計(jì)四因素三水平正交試驗(yàn)確定棒狀乳桿菌產(chǎn)共軛亞油酸的最優(yōu)組合為培養(yǎng)

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