1、金黃色葡萄球菌趨化抑制蛋白(ChemotaxisInhibitoryProteinofStaphylococcusaureus，CHIPS)是由金黃色葡萄球菌分泌到菌體外的一種蛋白，能特異性地與中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞上的C5a受體(C5aR)和fMLP受體(FPR)結(jié)合，從而阻止細(xì)胞的趨化作用。但是，可否將CHIPS作為藥物來治療由C5a或fMLP誘發(fā)的炎癥性疾病或?qū)HIPS作為免疫原來防制金黃色葡萄球菌感染，目前尚不清楚。 本

2、試驗(yàn)設(shè)計(jì)合成了一對(duì)PCR擴(kuò)增特異性引物，分別從金黃色葡萄球Newman株和CowanI株中擴(kuò)增獲得了CHIPS基因，進(jìn)一步將其克隆到pMD18-T載體獲得重組質(zhì)粒pMD-N和pMD-C，并對(duì)其進(jìn)行測序分析。結(jié)果，與GenBank中提供的CHIPS基因序列相比，Newman株具有100％的同源性，CowanI株只有一個(gè)堿基突變R298A→G；二者氨基酸同源性均為100％。說明CHIPS基因高度保守。 將pMD-N/pMD-C質(zhì)粒和

3、pET32a(+)表達(dá)載體進(jìn)行BamHI和SalI雙酶切，回收CHIPS基因片段，將其插入到pET32a(+)原核表達(dá)載體并轉(zhuǎn)化到BL-21(DE3)E.coli，經(jīng)篩選分別獲得pET-N/DE3和pET-C/DE3重組體細(xì)菌。經(jīng)IPTG誘導(dǎo)表達(dá)和SDS-PAGE分析，結(jié)果與對(duì)照菌株相比，誘導(dǎo)后的pET-N/DE3和pET-C/DE3表達(dá)約為31.8kDa的融合蛋白，且表達(dá)蛋白存在于菌體超聲波裂解上清中；進(jìn)一步對(duì)其進(jìn)行western-b