1、一、大鼠脊髓損傷模型的建立
　　研究背景和目的：脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）的實驗動物模型有多種，其中Allen打擊模型因其致傷機制更貼近于臨床，并且可以通過調節(jié)打擊重量以及打擊距離制作不同損傷程度的動物SCI模型，所以得到了廣泛的應用。但是多數用于制作Allen打擊模型的設備過于復雜，不適宜推廣使用。為此，我們參考相關文獻，制作了簡化的打擊支架，用于制作大鼠SCI模型，并進一步探討一定劑量X線照射對大

2、鼠SCI的治療效應。
　　方法：根據Allen打擊的原理制作了大鼠SCI打擊器。選用雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠，按Allen打擊法對大鼠脊髓T11-12節(jié)段進行打擊，打擊能量為30g×5cm。對所有實驗動物進行生理狀態(tài)觀察，雙后肢運動功能評定、體感誘發(fā)電位及組織學檢測以了解脊髓損傷程度。觀察大鼠脊髓損傷區(qū)組織結構的完整性及雙后肢神經功能的恢復程度。
　　結果：SCI術前與術后2w實驗動物毛發(fā)色澤、飲食狀況等

3、生理狀態(tài)無顯著差異。SCI后1天因失血過多死亡1只；SCI后2周內因頑固性感染死亡2只。術后2w共有4只大鼠后肢BBB評分8分以上，其余均在4分以下。HE染色顯示SCI術后大鼠脊髓組織結構破壞，部分區(qū)域形成空腔。最終造模成功率90﹪。
　　結論：自制打擊器制作Allen打擊脊髓損傷模型操作簡單、經濟實用。動物脊髓打擊損傷模型穩(wěn)定性、可重復性及成功率高，是一種值得廣泛應用的脊髓損傷模型。
　　二、局部X線照射治療大鼠脊髓損傷方

4、法的研究
　　研究背景和目的：研究表明適當劑量的 X線局部照射可以改善大鼠脊髓損傷區(qū)的微環(huán)境，促進損傷脊髓組織結構的修復以及大鼠雙后肢運動功能的恢復。本研究的前期研究也證實10Gy和20Gy X線照射可以促進損傷脊髓組織結構的修復，但單次劑量過大可能會帶來一定的輻射損傷。所以，本研究采用類似腫瘤放射治療中使用的分割照射方法來對大鼠脊髓損傷模型進行干預，以了解該干預方法是否同樣可以改善大鼠的脊髓組織結構和神經功能。
　　方法：

5、使用第一部分所述的自制大鼠SCI造模支架采用Allen打擊法制作大鼠脊髓損傷模型，雌性SD大鼠共70只，脊髓損傷節(jié)段為T11-12。將所有脊髓損傷實驗動物模型隨機分為四組：空白組（10只），SCI組（20只），SCI+20Gy照射組（20只），SCI+分割照射組（20只）；照射組于SCI后2周接受適量X線照射，空白組和SCI組不給予照射。各組實驗動物均于SCI后6周處死，期間予以BBB評分、體感誘發(fā)電位檢測等，處死后取材予以組織學檢測，

6、綜合評價實驗動物脊髓損傷區(qū)組織結構及大鼠雙后肢運動功能的恢復情況。
　　結果：實驗期間共有6只大鼠因各種原因死亡。BBB評分SCI組由術后2周時（1.3±0.3）分提高到（3.1±0.5）分，SCI+單次照射組由（1.4±0.3）分提高到（7.2±0.6）分，SCI+分割照射組由（1.3±0.4）分提高到（6.9±0.7）分，兩照射組BBB評分較SCI組顯著提高（P<0.05）；體感誘發(fā)電位檢測顯示SCI組、SCI+單次照射組及S

7、CI+分割照射組潛伏期均較正常大鼠延長，但兩照射組延長時間較SCI組略短；SCI組NF計數為（20.5±3.4）、MBP計數為（273.4±12.5），SCI+單次照射組NF計數為（67.6±5.9）、MBP計數為（202.8±13.1），SCI+分割照射組 NF計數為（71.2±5.3）、MBP計數為（198.4±11.7）；兩照射組 NF計數較 SCI組顯著提高（P<0.05）。免疫熒光法檢測到兩照射組NF表達區(qū)域較SCI組顯著增多

8、（P<0.05），GFAP表達兩照射組較SCI組顯著降低（P<0.05）。
　　結論：適當劑量的 X線照射能減少大鼠脊髓損傷區(qū)膠質瘢痕的形成，促進大鼠脊髓損傷后組織結構的修復和神經功能的恢復，合理的分割照射方案可以得到同樣的組織放射效應。
　　三、局部X線分割照射聯(lián)合GM-1治療大鼠脊髓損傷的研究
　　研究背景和目的：SCI的治療比較復雜，祛除某一個致病因素往往療效不佳。本研究第二部分結果顯示分割照射與單次照射均能改善

9、大鼠 SCI區(qū)組織結構及雙后肢運動功能。本部分擬通過聯(lián)合X線分割照射和神經節(jié)苷酯（GM-1）注射---意圖在抑制脊髓損傷修復的抑制因素的同時結合促進因子（GM-1）---來探尋脊髓損傷治療的有效方法。
　　方法：采用第一部分所述Allen打擊法制作大鼠脊髓損傷模型，選用雌性SD大鼠共60只。將所有脊髓損傷實驗動物模型隨機分為四組：SCI組（15只），SCI+分割照射組（15只），SCI+GM-1組（15只），SCI+分割照射+GM

10、-1組（15只）；GM-1組和SCI+分割照射+GM-1組于SCI后第2天腹腔注射GM-1，30mg/kg，SCI組和SCI+分割照射組同時注射同等量生理鹽水，連續(xù)一周；SCI+分割照射組和SCI+分割照射+GM-1組于SCI后2周對大鼠損傷區(qū)脊髓進行X線照射，SCI組及SCI+GM-1組予以假照射。各組實驗動物均于SCI后6周處死，同樣采用BBB評分、體感誘發(fā)電位評價實驗動物雙后肢運動功能，組織學檢測評價實驗動物脊髓損傷區(qū)組織結構的恢

11、復情況。
　　結果：實驗結束時共4只大鼠因各類原因死亡。BBB評分SCI組由照射前（1.3±0.4）分提高到（3.0±0.5）分，SCI+分割照射組由（1.4±0.5）分提高到（7.1±0.3）分，SCI+GM-1組由（1.3±0.3）分提高到（5.7±0.5）分，SCI+分割照射+GM-1組由（1.2±0.4）分提高到（8.3±0.3）分，三個治療組BBB評分較SCI組顯著提高（P<0.05），三組間無顯著差異（P>0.05）；

12、體感誘發(fā)電位檢測顯示 SCI組、SCI+分割照射組、SCI+GM-1組及SCI+分割照射+GM-1組潛伏期均較正常大鼠延長；SCI組NF計數為（21.2±3.7）、MBP計數為（278.2±10.3），SCI+分割照射組 NF計數為（65.3±6.5）、MBP計數為（196.4±12.7），SCI+GM-1組 NF計數為（37.8±6.2）、MBP計數為（235.4±13.5），SCI+分割照射+GM-1組NF計數為（74.3±5.9）

13、、MBP計數為（187.4±12.0）；三個治療組NF計數較SCI組顯著增高（P<0.05），三組間無顯著差異，但SCI+分割照射+GM-1組神經軸突成熟程度較其他各組明顯提高，脊髓組織結構較其他各組亦更為致密有序。Western blot法檢測結果顯示SCI+分割照射組及SCI+分割照射+GM-1組較SCI組和SCI+GM-1組GFAP、Vimentin的陽性表達顯著降低（P<0.05）。
　　結論：局部X線分割照射聯(lián)合GM-1