1、目前,利用RNA干涉文庫進行大規(guī)模、高通量的功能基因掃描已成為發(fā)現(xiàn)新功能基因的重要方式和手段。因此我們希望通過構建限制性siRNA干涉文庫掃描在細胞增殖和分化過程中具有重要作用的新功能基因。通過對原有siRNA表達載體進行改造,我們構建了新的雙啟動子siRNA表達載體；根據(jù)斯坦福大學2004年公布的在人類胚胎干細胞與造血干細胞增殖、分化過程中具有潛在功能的基因芯片分析結果(http：//smd-www.stanford.edu/cgi-

2、bin/source/sourceResult.html.),我們構建了與細胞增殖和分化相關基因siRNA干涉文庫。 該文庫目前包括靶向多個基因的載體,如轉錄因子、各類蛋白激酶、細胞周期調控蛋白以及一些未知功能基因在內的225個基因。利用這個限制性RNA干涉文庫,我們對控制細胞增殖的基因進行篩選。通過WST-1高通量掃描,我們發(fā)現(xiàn)了若干同細胞增殖相關的基因:CNKSR3(Homo sapiens CNKSR family m