1、目的：
　　研究木瓜（Chaenomeles speciosa(Sweet)Nakai)提取物對非酒精性脂肪肝病干預保護作用，并探討其作用機制。
　　方法：
　　(1)木瓜醇提取物分離與鑒定：資木瓜用70％乙醇回流蒸發(fā)后過濾，懸蒸去乙醇，離心取上清置于大孔樹脂用乙醇濃度為0%、10%、30%、50%、70%分段洗脫，分段收集洗脫液并濃縮，分段洗脫液與已知標準品作高效液相圖譜（HPLC）比對分析。
　　(2)木瓜提

2、取物對細胞脂毒性干預的測定：應用棕櫚酸（Palmitic acid,PA）作用于肝癌細胞系細胞（HepG2），建立PA誘導細胞脂毒性模型，加入不同濃度木瓜30%醇提取液，應用結晶紫方法測定細胞密度、甘油三酯測定及尼羅紅流式分析，反映藥物的脂毒性干預作用。
　　(3)高糖高脂誘導非酒精性脂肪肝病小鼠模型及木瓜30%醇洗脫液干預作用：昆明鼠分為正常對照組,高糖高脂模型組，木瓜30%醇洗脫液低劑量(100mg/kg體重)組、中劑量組(2

3、00mg/kg體重)、高劑量組(300mg/kg體重)。正常對照組給與普通飼料，模型組和用藥組給與高糖高脂飼料，用藥組飼料為自制高糖高脂飼料及按用藥比例加入相應木瓜30%醇洗脫液。4周處死小鼠檢測相應生化指標，肝臟HE染色、油紅O染色及β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色觀察組織結構變化，反映模型的建立及藥物干預作用；
　　(4)應用RT-PCR和western blotting檢測培養(yǎng)細胞和小鼠肝臟組織脂質(zhì)代謝基因和蛋白表達，及細胞

4、衰老相關指標的檢測。
　　結果：
　　(1)木瓜提取物制備及質(zhì)量控制：1000g資木瓜飲片經(jīng)過提取分離濃縮得到10%醇洗脫液組份3.90g、30%醇洗脫液組份17.29g、50%醇洗脫液組份37.50 g、70%醇洗脫液組份0.33 g；HPLC分析30%醇洗脫液組份在330nm特定條件下的指紋圖譜，其主峰與綠原酸高度相似，可以作為提取物質(zhì)量控制標準，其他組份成分尚不明。
　　(2)結晶紫法檢測顯示PA對細胞毒性有劑量

5、依賴性，木瓜30%醇洗脫液改善PA對HepG2細胞生長抑制；木瓜30%醇洗脫液可以改善細胞周期阻滯作用（流式細胞學檢測），及P16、P21基因轉錄水平（RT-PCR）。
　　(3)木瓜30%醇洗脫液降低細胞內(nèi)甘油三酯含量、尼羅紅染色的熒光強度，改善脂質(zhì)在肝細胞的沉積。
　　(4)木瓜30%醇洗脫液可以明顯改善高糖高脂誘導的非酒精性脂肪肝病模型小鼠胰島素抵抗（糖耐量實驗），降低模型小鼠血糖血脂及轉氨酶水平。
　　(5)H

6、E染色、油紅O染色顯示木瓜30%醇洗脫液可以降低模型小鼠肝脂肪變性。
　　(6)木瓜30%醇洗脫液可以改善脂代謝紊亂，小鼠肝組織脂代謝相關基因ACC-1、LXR、ACSL、ChREBP表達下降。
　　(7)β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色提示木瓜30%醇洗脫液可以降低模型小鼠肝細胞β-Gal陽性細胞數(shù)量；木瓜30%醇洗脫液可以降低模型小鼠肝組織衰老相關基因P21、P53表達；降低其TLR-4及內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應激相關Grp78、CHO