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文檔簡介
1、目的
探討系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)患者中動脈粥樣硬化相關(guān)因子的表達(dá)與疾病活動性或傳統(tǒng)風(fēng)險因素的關(guān)聯(lián)性;通過體外研究觀察青蒿琥酯(ART)對這些因子的調(diào)控作用并初步探討其可能的機制,為狼瘡早發(fā)動脈粥樣硬化的防治提供一定的理論和實驗依據(jù)。
方法
1、搜集35例SLE患者的臨床資料,分別計算出疾病活動指數(shù)(SLEDAI)、10年內(nèi)發(fā)生嚴(yán)重心血管事件危險率,檢測相應(yīng)患者血漿中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEG
2、F)及巨噬細(xì)胞移動抑制因子(MIF)水平,并根據(jù)干擾素(IFN)誘導(dǎo)基因表達(dá)水平計算干擾素指數(shù),根據(jù)危險率或SLEDAI高低把SLE組分為兩組,用t檢驗分別檢測兩組間的VEGF、MIF、干擾素指數(shù);另分析10年內(nèi)發(fā)生嚴(yán)重心血管事件危險率與SLEDAI的相關(guān)性。
2、收集7例SLE患者的外周血,分離外周血單個核細(xì)胞(PBMC)。每個患者的PBMC分為兩組:ART組(5μmol/LART處理)和對照組,12小時后以實時熒光定量
3、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(Q-PCR)法檢測細(xì)胞中I型IFN誘導(dǎo)基因LY6E、ISG15mRNA的表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法檢測培養(yǎng)上清液中VEGF及MIF水平。
3、用不同劑量(0、5、20μmol/L)的ART處理有/無IFN-α-1b刺激的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)6、12或24小時,以Q-PCR檢測細(xì)胞中LY6E、ISG15mRNA的表達(dá)水平,ELISA檢測培養(yǎng)上清液VEGF及MIF水平。以地塞米松(
4、DEX)為陽性對照組。
結(jié)果
1、SLEDAI高分組較低分組MIF水平顯著升高(p=0.002),VEGF水平顯著降低(p=0.02),干擾素指數(shù)顯著升高(p=0.028);SLE患者發(fā)生嚴(yán)重心血管事件高風(fēng)險組與低風(fēng)險組比其MIF水平較高但無統(tǒng)計學(xué)意義,VEGF及干擾素指數(shù)無明顯變化;SLE患者10年內(nèi)發(fā)生心血管事件危險率與疾病活動指標(biāo)SLEDAI評分具有一定相關(guān)性(r=0.365,p<0.05)。
5、 2、與對照組相比,ART組處理的PBMC其LY6E、ISG15mRNA表達(dá)顯著降低(P<0.05),MIF、VEGF水平明顯降低(P<0.001)差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。
3、與對照組相比,經(jīng)IFN-α-1b刺激后6h、12h或24h的HUVEC表達(dá)LY6E、ISG15mRNA顯著升高(P<0.05),MIF水平明顯升高(P<0.05),VEGF水平明顯降低(P<0.05),差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。經(jīng)IFN預(yù)處理12h的HU
6、VEC,以ART或DEX處理后LY6E、ISG15表達(dá)均較對照組明顯下降;同時VEGF、MIF水平明顯降低(P<0.05),有統(tǒng)計學(xué)意義;DEX組與ART組間無明顯差異性。未經(jīng)干擾素刺激的HUVEC,ART組和DEX組與對照組相比LY6E、ISG15表達(dá)明顯下降(P<0.05);VEGF、MIF亦有不同程度下降(P<0.05或>0.05)。
結(jié)論
1、狼瘡患者動脈粥樣硬化相關(guān)因子與疾病本身及其活動關(guān)系較密切,
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