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文檔簡介
1、目的：(1)培養(yǎng)轉染所需兔骨髓間充質干細胞(bone marrow mesenchymal stem cells，BMSCs)。(2)通過采用陽性脂質體pcDNA3.1(-)介導的轉染到BMSCs方法，獲得穩(wěn)定轉染的BMSCs細胞。(3)使用免疫組化、WesternBlot法檢測pcDNA3.1-hBMP2在兔BMSCs中蛋白的表達情況。
方法：(1)貼壁法培養(yǎng)擴增所需BMSCs并從形態(tài)學、流式細胞儀測量表面標記物。(2)
2、將已成功構建的pcDNA3.1-hBMP2重組質粒進行體外靶細胞轉染并使用G418篩選穩(wěn)定表達細胞。(3)通過免疫組化、WesternBlot法檢測其在BMSCs中的蛋白表達。
結果：(1)經培養(yǎng)，擴增兔骨髓間充質干細胞，P2、P3可作為hBMP2轉染的靶細胞。(2)用陽離子脂質體轉染pcDNA3.1-hBMP2的MSCs經G418篩選后，經免疫組化、WesternBlot法檢測，轉染pcDNA3.1-hBMP2后的兔骨髓
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