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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
觀察黃連素對(duì)去甲腎上腺素(NE)誘導(dǎo)的大鼠心肌損傷是否具有保護(hù)作用及其量效關(guān)系,并初步探討其可能的機(jī)制。
方法:
本實(shí)驗(yàn)采用腹腔注射去甲腎上腺素(3mg/kg)的方法來(lái)制造大鼠心肌損傷的模型。實(shí)驗(yàn)分為5組:正常對(duì)照組、模型組、黃連素低劑量組(0.1mg/kg.d)、黃連素中劑量組(0.2mg/kg.d)、黃連素高劑量組(0.4mg/kg.d)。造模完畢后4小時(shí)采用10%水合氯醛(每0.3
2、ml/100g)腹腔注射麻醉,待大鼠麻醉好后,先用BL-420E生物機(jī)能實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)檢測(cè)大鼠心功能,再?gòu)母怪鲃?dòng)脈取血,然后迅速開(kāi)胸剖取心臟,部分制成心肌組織勻漿,剩余制成石蠟切片,最后行如下的檢測(cè):采用電化學(xué)發(fā)光法測(cè)定血清肌鈣蛋白T,采用光學(xué)顯微鏡觀察HE染色心肌組織,采用ELISA法檢測(cè)血清腫瘤壞死因子α(WNF-α),采用試劑盒中相應(yīng)方法檢測(cè)血清中某些氧化應(yīng)激指標(biāo)(SOD、MDA、CAT),采用TUNEL試劑盒測(cè)定心肌細(xì)胞凋亡率,采用w
3、estern-blot檢測(cè)心肌組織中Bcl-2和Bax的蛋白表達(dá),采用分光光度法檢測(cè)心肌組織中Caspase-3活性,使用皮爾遜相關(guān)性分析研究黃連素的量效關(guān)系。
結(jié)果:
與正常對(duì)照組相比,模型組的LVSP、±dp/dtmax絕對(duì)值均下降(P<0.01),而LVEDP升高(P<0.01);HE染色發(fā)現(xiàn)心肌損傷很嚴(yán)重;血清cTnT水平顯著升高(P<0.01);血清SOD、CAT的活性均顯著下降(P<0.01),而
4、MDA的含量顯著升高(P<0.01);血清TNF-α值明顯升高(P<0.01);心肌細(xì)胞凋亡率顯著上升(P<0.01);心肌組織中Bax蛋白表達(dá)量顯著增加(P<0.01)、Bcl-2蛋白表達(dá)量顯著減少(P<0.01);心肌組織中Caspase-3活性明顯增強(qiáng)(P<0.01)。
與模型組相比,黃連素預(yù)處理組的LVSP、±dp/dtmax絕對(duì)值均升高(P<0.01),而LVEDP均下降(P<0.01);HE染色發(fā)現(xiàn)心肌損傷情況
5、有不同程度的改善;血清cTnT水平明顯降低(P<0.01);血清SOD、CAT的活性均顯著升高(P<0.01),而MDA的含量均顯著下降(P<0.01);血清TNF-α值明顯減少(P<0.01);心肌細(xì)胞凋亡率顯著下降(P<.01);心肌組織中Bax蛋白表達(dá)量顯著減少(P<0.01)、Bcl-2蛋白表達(dá)量顯著增加(P<0.01);心肌組織中Caspase-3活性明顯減弱(P<0.01)。
不同劑量黃連素預(yù)處理組之間相比,用
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