亞臨界萃取梔子功能成分及活性研究.pdf_第1頁(yè)
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1、本文以DPPH自由基清除能力為評(píng)價(jià)指標(biāo),對(duì)脫脂梔子果仁中功能成分的提取方法進(jìn)行篩選,并對(duì)亞臨界提取工藝進(jìn)行優(yōu)化。運(yùn)用分極相萃取法對(duì)亞臨界梔子粗提物進(jìn)行萃取分析,并研究其生物活性。主要研究結(jié)果如下:
  (1)脫脂梔子果仁中抗氧化成分提取方法的篩選
  以DPPH自由基清除能力為評(píng)價(jià)指標(biāo),比較回流、超聲、微波和亞臨界四種提取方法對(duì)梔子提取物抗氧化活性的影響,同時(shí)對(duì)其進(jìn)行成分分析及乙酰膽堿酯酶活性抑制性研究。結(jié)果表明:梔子的亞臨

2、界乙醇提取物中總環(huán)烯醚萜類物質(zhì)含量為68.86%;DPPH自由基清除能力的IC50值為193.90μg/mL;在濃度為5.0 mg/mL時(shí),對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制率為70.39%。亞臨界乙醇提取方法優(yōu)于另外三種方法。
  (2)梔子亞臨界提取工藝條件優(yōu)化
  選取萃取溫度、萃取時(shí)間、乙醇濃度三個(gè)因素,以DPPH自由基清除能力為響應(yīng)值,進(jìn)行三因素三水平實(shí)驗(yàn),優(yōu)化梔子亞臨界乙醇提取工藝。最佳工藝條件為:提取溫度140℃,萃取時(shí)間9

3、 min,乙醇體積濃度60%。在此工藝條件下得到梔子提取物對(duì)DPPH自由基的清除能力達(dá)最大值90.01%。與理論預(yù)測(cè)值基本相符。
  (3)梔子提取物的分離及成分分析
  利用最佳提取工藝條件獲得梔子提取物,并用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇進(jìn)一步萃取,得各極相萃取物。采用比色法、HPLC法進(jìn)行成分分析,采用DPPH法評(píng)價(jià)抗氧化活性,采用Ellman's法測(cè)定對(duì)乙酰膽堿酯酶的抑制作用,利用MTT檢測(cè)對(duì)PC12細(xì)胞的作用。研究結(jié)果表

4、明:各極相梔子提取物的主要成分為環(huán)烯醚萜類,其中乙酸乙酯相中含量最高,為80.95%; HPLC結(jié)果顯示,京尼平苷在正丁醇相中含量最高,為206.31 mg/g,其次為乙酸乙酯相,含量為196.09 mg/g。比較DPPH自由基清除能力發(fā)現(xiàn)乙酸乙酯相活性最強(qiáng),其IC50值為39.08μg/mL;在濃度為1.0 mg/mL時(shí),對(duì)乙酰膽堿酯酶的活性抑制率達(dá)90.64%;在6.25μg/mL~100μg/mL濃度范圍內(nèi)對(duì)H2O2損傷的PC12

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