基于三鏈核酸探針的SERS傳感體系設(shè)計(jì).pdf_第1頁(yè)
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1、表面增強(qiáng)拉曼散射(Surface Enhanced Raman Scattering,SERS)由于其高探測(cè)靈敏度、高分辨率、水干擾性小、可淬滅熒光、穩(wěn)定性好等特點(diǎn)迅速發(fā)展。由于SERS能直接提供表面吸附物種及其與金屬表面作用的詳細(xì)信息,廣泛應(yīng)用在各個(gè)科學(xué)領(lǐng)域如材料、催化、電化學(xué)、腐蝕及防腐、分析化學(xué)、傳感器、生化、醫(yī)學(xué)等方面。功能核酸探針設(shè)計(jì)簡(jiǎn)單、穩(wěn)定性好,且具有高選擇性、高特異性及易合成修飾和信號(hào)機(jī)制轉(zhuǎn)換靈活等優(yōu)勢(shì),已被廣泛應(yīng)用于生

2、物傳感、生物醫(yī)學(xué)、分析化學(xué)、疾病診斷與新藥研發(fā)等方面?;谝陨峡紤],本文著眼于核酸探針靈活的信號(hào)轉(zhuǎn)換機(jī)制和SERS的高探測(cè)靈敏度,將核酸探針與SERS相結(jié)合,實(shí)現(xiàn)高靈敏、特異性生物分子檢測(cè),主要內(nèi)容包括如下兩個(gè)方面:
  (1)以60nm的金納米顆粒作為SERS基底,羅丹明分子作為拉曼信號(hào)分子,利用SERS的化學(xué)增強(qiáng)機(jī)理,發(fā)展了一種基于三鏈核酸探針和SERS的方法高靈敏高選擇性的檢測(cè)DNA核苷酸并進(jìn)行SNPs分析。該方法將三鏈核酸

3、探針作為捕獲核酸探針,通過(guò)引入檢測(cè)對(duì)象引起底物探針的結(jié)構(gòu)的變化,實(shí)現(xiàn)SERS信號(hào)的變化。檢測(cè)對(duì)象不存在時(shí),體系以三鏈結(jié)構(gòu)存在,使得修飾在金納米顆粒上的發(fā)夾型結(jié)構(gòu)處于直立狀態(tài),標(biāo)記在其3’端的羅丹明(Rox)分子遠(yuǎn)離金納米顆粒表面,拉曼信號(hào)很微弱;當(dāng)引入檢測(cè)對(duì)象后,檢測(cè)對(duì)象與捕獲探針雜交,破壞原體系中的三鏈結(jié)構(gòu),修飾在金納米顆粒表面的發(fā)夾型結(jié)構(gòu)恢復(fù),拉近了Rox與金納米顆粒表面之間的距離,拉曼信號(hào)顯著增強(qiáng)。實(shí)現(xiàn)快速、靈敏的DNA檢測(cè)。

4、r>  (2)基于銀納米顆粒與金膜之間產(chǎn)生“熱點(diǎn)”使拉曼散射強(qiáng)度增強(qiáng)的原理,利用羅丹明6G(R6G)分子作為拉曼信號(hào)產(chǎn)生的活性分子,結(jié)合核酸探針的靈活的信號(hào)轉(zhuǎn)換機(jī)制,發(fā)展了一種基于三鏈核酸探針和SERS的生物小分子-腺嘌呤核糖核苷三磷酸(ATP)的檢測(cè)新方法。該方法利用ATP的引入改變拉曼信號(hào)實(shí)現(xiàn)ATP的快速靈敏檢測(cè)。當(dāng)ATP不存在時(shí),ATP-核酸適配體(aptamer)與底物探針形成三鏈剛性結(jié)構(gòu),支撐起用R6G修飾的銀納米顆粒,遠(yuǎn)離金

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