近紅外激光在食源性致病菌快速檢測中的應用基礎研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、食源性致病菌是引起食源性疾病的首要原因?,F(xiàn)有檢測方法或前處理步驟復雜、檢測結果假陽性率偏高,或儀器龐大昂貴、對環(huán)境要求高,都不適應現(xiàn)場的快速檢測。近紅外激光技術具有快速、穿透性強、無破壞、無污染的優(yōu)點,研究嘗試將近紅外激光與現(xiàn)有技術相結合,克服其局限性,實現(xiàn)食源性致病菌快速靈敏檢測。具體內容如下:
  1、基于近紅外激光成像技術的食源性致病菌的分類鑒別研究。首先搭建了近紅外激光成像系統(tǒng),采集四組細菌(大腸桿菌 E.coli、金黃色

2、葡萄球菌S.aureus、沙門氏菌S.typhimurium以及三種細菌混合物)菌落的紋理圖像;運用標準矩對其進行歸一化預處理,消除菌落大小不一致的影響;接著從中提取Zernike矩特征,作為分類模型的輸入;最后有比較地利用線性(LDA、KNN與PLSDA)和非線性(BPANN、SVM與ELM)算法建立分類模型,非線性模型識別效果優(yōu)于線性模型,尤其是ELM模型,達到95%。研究表明利用近紅外激光成像系統(tǒng)結合模式識別算法可以實現(xiàn)食源性致病

3、菌的快速分類鑒別。
  2、近紅外激發(fā)上轉換熒光光譜定量檢測單一食源性致病菌(以E.coli為例)。首先制備上轉換納米顆粒(NaYF4:Yb3+, Er3+),然后將其與E.coli特異性抗體結合,作為熒光探針,捕獲E.coli。采用離心法分離出未結合的探針,測其熒光光譜,建立上轉換熒光強度與菌液濃度關系的標準曲線,相關系數(shù)為0.9802,檢測范圍為42-42×106 cfu ml-1,檢測限為10 cfu ml-1,說明本方法檢

4、測范圍廣,靈敏度高。最后將本方法用于食物中E.coli的檢測,檢測結果與制樣前添加濃度基本一致,說明本方法可用于實際食物中致病菌的檢測,結果準確可靠。我們還將本方法與目前現(xiàn)有免疫標記方法作了對比,結果表明無論是檢測范圍還是檢測限,本方法均表現(xiàn)出明顯的優(yōu)勢。
  3、近紅外激發(fā)上轉換熒光光譜同時檢測多種食源性致病菌(以E.coli和S.aureus為例)。首先制備上轉換納米顆粒(NaYF4:Yb3+, Er3+和NaYF4:Yb3+

5、, Tm3+),然后將其分別與E.coli和S.aureus特異性抗體結合,等量混合后形成多標記熒光探針,同時檢測E.coli和S.aureus。采用離心法分離出未結合的探針,測其熒光光譜,根據(jù)兩種細菌各自的特征峰,分別建立熒光強度與菌液濃度關系的標準曲線。其中E.coli標準曲線相關系數(shù)為0.9800,檢測范圍為47-47×106 cfu ml-1,檢測限為13 cfu ml-1;S.aureus標準曲線相關系數(shù)為0.9657,檢測范

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