1、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)是一種廣泛存在于動物、植物和微生物中的金屬蛋白酶，它能夠催化超氧陰離子自由基(O-2·)發(fā)生歧化反應，清除生物體內的自由基，在食品、化妝品、醫(yī)療等行業(yè)得到廣泛應用。我國是一個兔業(yè)大國，兔血資源豐富，但是大量的兔血都未被充分利用。兔血中含有豐富的SOD，本試驗采用新鮮兔血為原料提取SOD，并以牛乳為載體，SOD作為功能因子，研制富含SOD的酸奶，這為SOD保健食品的開發(fā)提供

2、一個有效途徑。在此過程中主要研究了:超聲波制備溶血液和熱變性法除雜蛋白的最佳工藝條件;SOD的純化及其部分性質的研究;SOD酸奶對人工胃腸道消化液的穩(wěn)定性和貯藏穩(wěn)定性。主要研究結果如下:
　　1.采用超聲波與溶脹法相結合制備溶血液，考察紅細胞與水的體積比、超聲時間和超聲功率對SOD比活力的影響，通過單因素和正交試驗得到最佳工藝參數為:紅細胞與水體積比為5∶1，超聲時間10min，超聲功率200W，在此條件下得到的溶血液中SOD比活

3、力最高。
　　2.采用熱變性法除雜蛋白，考察熱變性過程中熱變性時間、熱變性溫度和CuCl2體積分數對SOD比活力的影響，利用響應面分析法對其工藝條件進行優(yōu)化，結果表明:CuCl2體積分數對熱變性法提取SOD比活力影響最大，其次是熱變性時間和溫度;經響應面法建立的回歸模型極顯著(P＜0.01)，可用于實際值的預測;優(yōu)化得到熱變性除雜蛋白的最佳工藝參數為熱變性時間10.60min、熱變性溫度54.95℃、CuCl2體積分數1.09％，

4、在此條件下，SOD比活力為2165.39U/mg;驗證實驗得到的SOD比活力為（2204.50±12.63）U/mg，與預測值的相對誤差為1.77％，表明可以采用響應面分析法對熱變性法除雜蛋白最佳工藝條件進行優(yōu)化。
　　3.采用丙酮沉淀和柱層析對SOD進行純化，結果表明:當冷丙酮體積為粗酶液體積的1.0倍，靜置時間為30min時，得到的SOD比活力最大;經SephadexG-75凝膠過濾與Macro-Prep DEAE suppo

5、rt陰離子交換層析，收集酶液超濾濃縮，測得酶的總活力為20474U，比活力為15749.23 U/mg，回收率達19.08％，純化倍數為487.47。
　　4.對純化得到的SOD進行純度和種類鑒定，并考察其部分性質，結果表明:純化得到的SOD已達到電泳純度，測得兔血SOD的亞基分子量約16.0KDa，最大紫外吸收峰為270nm，對H2O2敏感;pH值在5.0～9.0范圍內，溫度在50℃以下具有較好的穩(wěn)定性，表明純化得到的兔血SOD

6、為Cu，Zn-SOD。
　　5.考察SOD酸奶在模擬胃腸道環(huán)境中的穩(wěn)定性。結果表明，SOD及SOD酸奶中的SOD在pH2的人工胃液中作用3h后，SOD剩余活性為0.1％和8.7％，而在pH3和4的人工胃液中能保持較高的活性，分別為50.4％、60.7％和65.4％、84.4％;在人工腸液中作用4h后，SOD剩余活性為44.8％;在不同濃度的膽鹽溶液中作用4h后，SOD剩余活性均在87.4％以上;在人工胃液、腸液的連續(xù)消化結束后，S

7、OD溶液及SOD酸奶中SOD剩余活性分別為15.4％和72.4％?？梢?，SOD對pH3以上的人工胃液、人工腸液、膽鹽具有較好的耐受性，而SOD酸奶中的SOD對模擬胃腸道消化液具有更高的穩(wěn)定性。
　　6.SOD酸奶在4℃的條件下貯藏，貯藏6d后，酸奶中SOD剩余活性為84.5％,貯藏14d后，剩余活性為64％;pH值和酸度變化不明顯，且各組間差異不顯著;TBA值里上升趨勢，在貯藏12d后有所減小，試驗組的TBA值均比對照組（未添加S