1、納米材料由于獨特的微尺寸效應、表面效應、量子效應和宏觀量子隧道效應，其化學、電學、光學、磁學性質(zhì)顯示出常規(guī)材料所不可比擬的優(yōu)越性能，已經(jīng)引起多領域?qū)＜覍W者的關注。核酸染料，如SYBR GreenⅠ、SYBR Gold等也早已得到廣泛研究和應用。近年來，將納米材料以及核酸染料與生物傳感方法相結合設計的新型熒光生物傳感器，已經(jīng)在食品衛(wèi)生檢測、環(huán)境監(jiān)測、臨床診斷、生物醫(yī)學研究等領域得到廣泛應用。本研究論文主要圍繞銀納米簇、銅納米顆粒以及核酸染

2、料作為熒光信號探針，構建新型的熒光免標記生物傳感方法，實現(xiàn)了對核酸酶、生物小分子巰基化合物的檢測。
　?。?）第二章，基于富含鳥嘌呤核苷（富G堿基）的DNA序列靠近銀納米簇合成模版時，銀納米簇的熒光會顯著增強的原理，構建了一種新型的無標記檢測S1核酸酶的熒光生物傳感方法。S1核酸酶是一種單鏈特異性核酸內(nèi)切酶，若體系中不存在S1核酸酶，酶切作用的底物鏈B-DNA就會與富含鳥嘌呤核苷的G-DNA完全互補配對雜交，形成穩(wěn)定的雙螺旋結構，

3、以Ag-DNA為模版合成的銀納米簇因無法與富G序列的DNA相靠近僅能發(fā)出微弱的熒光信號強度；當反應體系中存在S1核酸酶時，B-DNA會被S1核酸酶水解成單核苷酸和寡核苷酸片段，從而無法與其互補鏈G-DNA雜交形成雙鏈，隨后加入的Ag NCs-DNA就會與G-DNA雜交，致使富G堿基的DNA序列靠近銀納米簇，熒光大大增強，根據(jù)熒光強度的變化情況，實現(xiàn)對目標核酸酶的靈敏性檢測。該傳感設計屬于熒光增強型，大大降低了假陽性信號的可能性，提高了檢

4、測的靈敏性；此外，該方法不需要核苷酸的標記或熒光化合物的合成，在操作上也更簡單快捷。同時，還可用于核酸酶抑制劑的篩選。
　?。?）第三章，建立了一種利用核酸染料SYBR Gold快速檢測S1核酸酶的傳感技術。本實驗的原理是基于核酸染料SYBR Gold在溶液中的熒光強度很弱，但是其與單鏈 DNA結合后熒光信號會大幅度增強的特性，當體系中存在S1核酸酶時，S1核酸酶會將單鏈 DNA水解成單個的堿基或寡聚核苷酸片段，熒光強度會大大降低

5、。該傳感方法簡單、快速、成本低。
　　（3）第四章，基于聚胸腺嘧啶寡聚核苷酸（poly(T)）為模版合成的銅納米顆粒為熒光信號探針，利用生物小分子巰基化合物（Cys、Hcy、GSH）對銅納米顆粒的猝滅作用實現(xiàn)了對巰基化合物的檢測，當體系中存在巰基化合物時，銅納米顆粒的熒光信號強度下降，根據(jù)熒光值的改變量可實現(xiàn)對目標物的定量檢測。該傳感方法在操作上簡單快速、不需要額外的標記或者修飾，而且原位合成銅納米顆粒的熒光信號產(chǎn)生快，檢測目標物