1、生物傳感器的研究已經(jīng)成為分析化學和生物化學領域中一個非常重要和令人感興趣的課題,人們對此作出了深入廣泛的研究。熒光化學傳感器是依靠熒光信號為檢測手段,通常有熒光的增強、淬滅或者發(fā)射波長的移動,具有方便快捷、較高的靈敏度與選擇性、可以利用光纖技術實現(xiàn)距離實時檢測等優(yōu)點,已成為光化學傳感器技術研究者們倍感興趣的研究領域。
　　 蛋白質是一類重要的生物標志物,許多腫瘤生物標志物就屬于酶類、抗原類物質及微球蛋白、鐵蛋白等蛋白類物質。在食

2、品中非法加入三聚氰胺引起的危害已經(jīng)引起了社會的關注。因為三聚氰胺的含氮量達到66％,所以關于非法在食品中添加三聚氰胺增加食品含氮量的報道常常見于報端,發(fā)展快速簡單的檢測實際樣品中三聚氰胺含量的方法是比較有用的。環(huán)境中的重金屬離子難以被微生物降解,可通過各種途徑進入人體并在體內長期積累,對身體造成危害,嚴重的將會危及生命。因此,建立簡單、快捷、靈敏、實用的檢測方法具有重要的意義。在本研究論文中,主要發(fā)展了幾種熒光生物傳感器。具體內容如下:

3、
　　 (1)在本章中我們報道了一種基于小分子-DNA復合物末端保護原理檢測蛋白的方法。首先小分子修飾DNA鏈,通過小分子和相應結合蛋白的特異性識別和RCA反應和ExoⅢ的放大實現(xiàn)對葉酸結合蛋白的檢測。反應過程均在均相中進行,DNA鏈上的小分子和蛋白結合后,在溶液中加入具有消化DNA單鏈的ExoⅠ,得到保護的DNA就不能被水解;接下來引入環(huán)形探針,模板鏈和環(huán)形探針進行雜交反應后,加入大腸桿菌連結酶和連接緩沖液進行連結;加入引物,

4、dNTPs和Bst聚合酶,RCA反應開始啟動,生成了一條具有重復序列的單鏈;最后加入一條和RCA產物其中一段序列互補的taqman探針(熒光基團和淬滅基團比較靠近,單獨存在時沒有熒光)和ExoⅢ,RCA產物和taqman探針雜交后,ExoⅢ開始水解雜交上去的taqman探針,從而使得熒光基團和淬滅基團分離開來,溶液產生熒光?？梢愿鶕?jù)熒光強度定量葉酸結合蛋白的濃度。
　　 (2)在本章中建立了一種利用核酸染料Sybr GreenⅠ

5、快速檢測三聚氰胺(melamine)的傳感器技術。傳感器構建的基礎是三聚氰胺誘使單鏈改變構型變成雙鏈,在雙鏈核酸染料的存在下引起熒光的差異到達檢測分析物的目的。Sybr GreenⅠ是一種雙鏈核酸染料,和單鏈的結合力很弱,所以如果緩沖液只含有Sybr GreenⅠ和polyT24時,溶液的熒光強度是很弱的。在加入目標物的情況下,三聚氰胺和胸腺嘧啶之間由于氫鍵的形成,從而可以形成T-melamien-T的構象,導致聚T鏈從單鏈構型改變其形

6、態(tài)形成發(fā)夾的結構,染料可以很好的嵌入雙鏈中,溶液可產生強熒光。檢測下限低于國際標準的食品中三聚氰胺含量。這種檢測方法簡單,快速。
　　 (3)因為銀離子對水中生物有毒害作用,而且其廣泛應用于電解工業(yè)、攝影、成像工業(yè)和醫(yī)藥。研究工作者已經(jīng)利用有機熒光物質和量子點發(fā)展了快速、簡易的化學傳感器檢測水中的銀離子,但是這些傳感器有些限制,比如比較低的水溶性、不夠靈敏。在第四章中報道了一種基于銀離子(Ag+)和胞嘧啶(C)之間的特異性識別的