1、波紋巴非蛤Paphia(Paratapes)undulata(Born)是南海分布廣泛的一種海產(chǎn)貝類,本論文以波紋巴非蛤為原料,從波紋巴非蛤中提取、分離、純化得到波紋巴非蛤糖胺聚糖,分析測定波紋巴非蛤糖胺聚糖主要化學組分含量,在此基礎上對其抗氧化、降血脂活性進行初步的研究,也為有效開發(fā)和利用波紋巴非蛤資源提供理論依據(jù),具有重要的理論意義和應用價值。主要內(nèi)容與結論包括以下四個部分:
　　 1.優(yōu)化波紋巴非蛤糖胺聚糖的提取工藝:在單

2、因素試驗基礎上,選擇提取水料比、酶解時間以及酶添加量為自變量,糖胺聚糖提取率為響應值,采用中心組合設計的方法,研究各自變量及其交互作用對糖胺聚糖提取率的影響。利用SAS和響應面分析相結合的方法,模擬得到二次多項式回歸方程的預測模型。優(yōu)化出酶解法提取糖胺聚糖的最佳條件為:水料比2.5:1、酶解時間3.5h、酶的添加量1(g/100g)。在此條件下,糖胺聚糖提取率可達到0.413％;
　　 2.在最優(yōu)條件下大量制備糖胺聚糖粗品(PU

3、G),通過等電點除蛋白后,進行超濾脫鹽獲得精制品(PUG-1),并采用DEAE-52-纖維素離子交換柱層析法對精制品進行純化,分離出來的兩個級分(PUG-1a,PUG-1b),檢測粗品,精制品和純品中的糖胺聚糖及組成成分,PUG、PUG-1、PUG-1a、PUG-1b測定結果:總糖含量為16.4％、19.2％、25.4％、22.4％；總蛋白質含量為28.7％、19.8％、10.3％、9.4％；總糖胺聚糖含量為31.4％、46.7％、68

4、.3％、62.8％;硫酸基含量為3.3％、5.6％、11.5％、15.2％;氨基半乳糖含量為3.4％、5.7％、10.7％、12.5％；己糖醛酸含量為9.5％、7.7％、15.2％、13.7％；氨基己糖含量為13.3％、20.6％、31.7％、35.1％。用高效凝膠過濾色譜(HPSEC)對純化品進行分子量測定,兩個級分分子量大約為30000Da和10000Da；采用紅外光譜法分析純品的各級分基團和結構等。得出兩個極分基團吸收峰有明顯的不

5、同,第一級分主要含有的單體是吡喃單體；第二級分含有較多的硫酸基和羧基,且含有α-糖苷鍵特征吸收；兩個極分都具有酸性多糖的特征吸收。
　　 3.體外抗氧化活性選用清除羥基自由基能力、超氧陰離子自由基能力、DPPH自由基能力三個指標。當PUG-1濃度達到6mg/mL時,對·OH的清除率最高,為55.4％;試驗結果也顯示,PUG和PUG-1的濃度小于5ml/mL的范圍內(nèi)與O2-·清除率都呈正向關系,PUG-1對O2-·清除率最高可達到

6、68.7％；在清除DPPH自由基的試驗結果表明,PuG-1濃度達到7mg/mL時,清除率最高,達到62％?？梢姴y巴非蛤糖胺聚糖表現(xiàn)出很好的清除自由基效果。
　　 體內(nèi)抗氧化試驗是用D-半乳糖所致衰老模型小鼠作為實驗對象,灌胃給予PUG-1100,200,400 mg/kg·d,4周后檢測其對小鼠血清、肝臟、腦組織中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、過氧化氫酶(CAT)含量的影響。結

7、果表明,PUG-1對小鼠體重增長無影響;PUG-1中、高劑量組血清的SOD和CAT含量顯著高于模型組(P<0.01),高劑量組小鼠血清、肝和腦組織的SOD、GSH-Px、CAT含量均顯著高于模型組(P<0.01)；給藥組小鼠的MDA含量低于模型組(P<0.05)。PUG-1可以劑量依賴性地提高衰老小鼠體內(nèi)抗氧化能力。
　　 4.采用預防性高血脂動物模型實驗方法考察波紋巴非蛤糖胺聚糖的降血脂活性,待測物PUG-1三個劑量組為100