傳統(tǒng)酸菜中抗菌性乳酸菌的篩選及其細(xì)菌素研究.pdf_第1頁(yè)
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文檔簡(jiǎn)介

1、本實(shí)驗(yàn)以?xún)?nèi)蒙古東部地區(qū)牧民家庭傳統(tǒng)方式發(fā)酵的酸菜液中分離出的84株乳酸菌(球菌60株,桿菌24株)為供試菌株,以大腸桿菌AS1.487為指示菌,采用平板打孔擴(kuò)散法進(jìn)行抑菌性能初步篩選。再以蠟狀芽孢桿菌、藤黃微球菌及部分真菌為指示菌進(jìn)行抑菌性能復(fù)篩,并對(duì)備選菌株所產(chǎn)細(xì)菌素的生物學(xué)特性及純化進(jìn)行了初步探討。結(jié)果表明,84株供試乳酸菌中有27株乳酸菌對(duì)指示菌大腸桿菌AS1.487抑菌效果明顯(抑菌圈均達(dá)到14.0mm以上)。經(jīng)過(guò)多種指示菌的反

2、復(fù)篩選,獲得了一株抑菌作用較廣的乳酸菌素產(chǎn)生菌 S1-4。該菌株不僅能抑制典型的G+和G-細(xì)菌(如蠟樣芽孢桿菌、大腸桿菌等),且排除酸干擾后對(duì)擴(kuò)展青霉等真菌仍有一定的抑制作用。乳酸菌S1-4所產(chǎn)細(xì)菌素的活性區(qū)域?yàn)樗嵝曰蛉跛岘h(huán)境,pH4.0時(shí)抑菌性能最強(qiáng),且該細(xì)菌素pH值在2.0-5.5之間對(duì)熱有耐受性,121℃處理30 min仍具有93.42%活性。經(jīng)酶處理得知,該乳酸菌所產(chǎn)的細(xì)菌素對(duì)木瓜蛋白酶較敏感(抑菌活性下降了18.42%),但對(duì)

3、胃蛋白酶和胰蛋白酶敏感性較弱。以硫酸銨梯度沉淀法分離并收集乳酸菌S1-4的發(fā)酵上清液,采用膜透析技術(shù)獲得的分子量在3.5kDa-8kDa的組分對(duì)蠟樣芽孢桿菌的抑菌效果最明顯。且經(jīng)SephadexG-15柱層析純化所得三個(gè)峰中,第二個(gè)峰收集的組分具有一定的抑菌活性。經(jīng)推斷該細(xì)菌素的主要抑菌活性物質(zhì)分子量約為6.7KDa,是一種小分子多肽,此峰的精純組分可用于進(jìn)一步研究。最后通過(guò)生理生化及分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)等特性研究,初步鑒定乳酸菌S1-4為植

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