姜黃素對卵巢癌細胞株HO-8910增殖和轉移作用的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討姜黃素(Curcumin,Cur)對卵巢癌細胞增殖和轉移的影響,為臨床用藥提供科學依據(jù)。 方法:①體外培養(yǎng)卵巢癌細胞株HO-8910。②采用MTT方法檢測對照組、不同濃度(5、10、20、30、40、50、60umol/ml)Cur干預組(干預24、48、72、96小時)吸光值,計算細胞抑制率值。③應用光學顯微鏡觀察不同組之間、不同時間點卵巢癌細胞形態(tài)改變。④利用RT-PCR技術與免疫細胞化學方法分別檢測小劑量藥物濃度

2、Cur(1、5、10、20umol/ml)干預24小時后基質金屬蛋白酶-2(matrixmetalloproteinases-2,MMP-2)、基質金屬蛋白酶-9(matrixmetalloproteinases-9,MMP-9)基因在轉錄及翻譯水平的表達以及其抑制物基質金屬蛋白酶抑制劑-2(tissueinhibitorofmetalloproteinase-2,TIMP-2)在翻譯水平的表達,與對照組進行比較。 結果:1、光

3、學顯微鏡觀察顯示:隨著姜黃素濃度的增高,卵巢癌細胞株形態(tài)逐漸發(fā)生變化,透光性及折光性降低,細胞皺縮,細胞數(shù)量減少,凋亡細胞增多。2、MTT結果顯示:隨著姜黃素濃度的增高,卵巢癌細胞OD570的值降低,提示細胞活力逐漸降低,即細胞抑制率增加。72小時內呈時間、濃度依賴性特點。在同一濃度組內,72小時時抑制率達高峰,96小時的細胞抑制率下降。不同濃度姜黃素與不同時間組之間均有顯著性差異(P<0.01)。3、免疫細胞化學結果顯示不同濃度姜黃素

4、培養(yǎng)的卵巢癌細胞,隨著藥物濃度增高,細胞數(shù)目逐漸減少,TIMP-2表達逐漸增強,MMP-2及MMP-9表達逐漸減弱。差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。4、RT-PCR結果顯示不同濃度姜黃素培養(yǎng)的卵巢癌細胞,隨著藥物濃度增高,MMP-2及MMP-9mRNA表達逐漸減弱,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。 結論:1、姜黃素能有效抑制人卵巢癌細胞株HO-8910體外增殖,72小時內呈時間、濃度依賴性特點。在同一濃度組內,72小時時抑制

5、率達高峰,96小時的細胞抑制率下降。40umol/l姜黃素作用24小時后細胞抑制率達51.75%。2、結合免疫細胞化學及RT-PCR,分析卵巢癌HO-8910細胞株于姜黃素干預后的MMPs改變,提示MMP-2、9表達下調及TIMP-2表達上調,說明姜黃素可下調MMPs的表達及調節(jié)MMPs/TIMPs的平衡,這些可能與姜黃素抑制卵巢癌細胞浸潤轉移能力有關。3、說明姜黃素抑制卵巢癌細胞增殖及轉移的機制十分復雜,作用靶點可以從DNA到mRNA

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