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文檔簡介
1、目的
本實驗通過對殼聚糖-絲素蛋白(chitosan-silkfibroinCS-SF)支架與殼聚糖-絲素蛋白-磷酸三鈣(chitosan-silkfibroin-tricalciumCS-SF-TCP)支架的基本性能、力學性能及異位成骨能力進行研究,尋求更適合牙周組織工程的支架。
方法
采用二次凍干技術制備兩種支架,液體替代法、冰凍切 片、INSTRON5544拉伸實驗機對其一般性能及力學性能進
2、行檢測、全髓貼壁法培養(yǎng)骨髓基質細胞(BMSCs)。將裸鼠24只、雄性、體重20~25g,采用完全隨機法分為4組,每組6只,CS-SF組、CS-SF+BMSCs組、CS-SF-TCP組、CS-SF-TCP+BMSCs組,所有的植入物均植入裸鼠背部皮下。每只裸鼠背部植入3塊。每組分別于術后4、8周各處死動物3只。通過大體觀察、組織學與Ⅰ型膠原免疫組織化學染色觀察兩種支架的成骨能力。
結果
1、支架的一般性能及力學性能的觀
3、察
CS-SF與CS-SF-TCP支架大體外觀呈白色疏松多孔海綿樣物質,有一定的彈性與脆性。兩種支架的孔隙率約為70%-80%,孔徑值為100-200μm。置于無水乙醇中有溶脹現象但未發(fā)生溶解。冰凍切片觀察支架的內部結構,可見支架孔徑較均勻且彼此相連。力學性能的結果顯示:CS-SF支架的壓縮強度為0.44±0.15MPa,CS-SF-TCP支架的壓縮強度為1.44±0.96MPa。
2、大體及組織學結果
所
4、有的植入物均被一層致密的纖維薄膜包繞,并發(fā)生肉眼可見的吸收現象,觸之稍硬。組織學染色顯示:4周時,CS-SF組與CS-SF-TCP組僅見支架的邊緣有纖維膜包繞,支架發(fā)生吸收斷裂,支架的中心并未見細胞的長入及膠原樣物質生成。CS-SF+BMSCs組與CS-SF-TCP+BMSCs組支架的邊緣有纖維膜包繞,支架的中心可見細胞及膠原樣物質生成。8周時,CS-SF組與CS-SF-TCP組支架的吸收更明顯,仍未見細胞長入。CS-SF+BMSCs組
5、與CS-SF-TCP+BMSCs組可見細胞樣物質增多,膠原樣物質增多增粗。所有組均未見有明顯的骨及類骨質樣物質生成。
3、Ⅰ型膠原免疫組織化學染色
所有組4、8周時均可見Ⅰ型膠原陽性表達,CS-SF組與CS-SF-TCP組陽性表達主要在支架的邊緣,CS-SF+BMSCs組與CS-SF-TCP+BMSCs組陽性表達主要在支架的孔隙表面及中央。4、8周時CS-SF-TCP+BMSCs的平均光密度值均高于CS-SF+BMS
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