子癇前期外周血及胎盤組織中相關蛋白的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的應用同位素標記相對和絕對定量(iTRAQ)技術聯(lián)合液相色譜—串聯(lián)質譜(LC-MS/MS)技術檢測子癇前期及正常妊娠孕婦血漿中的差異蛋白,從而篩選出潛在的子癇前期血漿生物標志物,并初步探討其在子癇前期中的可能作用機制。
  方法臨床收集2012年6月~2013年6月在青島大學附屬醫(yī)院產科住院期間子癇前期患者60例,其中子癇前期重度患者30例(重度組),子癇前期輕度患者30例(輕度組),同期正常妊娠孕婦30例(對照組)。采血分離血

2、漿提取總蛋白,隨后對重度組和對照組血漿總蛋白進行變性、還原、酶解,iTRAQ標記后用質譜儀進行鑒定,得到差異表達蛋白。選取差異蛋白Gelsolin、S100A8應用ELIAS、實時熒光定量PCR技術進行進一步驗證。
  結果①iTRAQ聯(lián)合LC-MS/MS技術共鑒定到血漿差異蛋白234個,重度組較對照組表達豐度相差1.5倍以上(上調比值>1.50或下調比值<0.67)且經(jīng)t檢驗證實差異有統(tǒng)計學意義的蛋白質點共有24個,其中14個蛋

3、白點較對照組表達上調,另10個點較之表達下調。②輕度組及重度組子癇前期患者血漿中Gelsolin水平分別為(0.288±0.013)ng/L、(0.363±0.152) ng/L,明顯高于對照組(0.204±0.101)ng/L,分別比較,差異均有統(tǒng)計學意(P<0.05);③輕度組及重度組子癇前期患者血漿中S100A8水平分別為(0.687±0.064) ng/L、(0.928±0.101)ng/L,明顯高于對照組(0.550±0.07

4、3)ng/L,分別比較,差異均有統(tǒng)計學意(P<0.05);④單因素方差分析顯示子癇前期患者胎盤組織中Gelsolin mRNA水平明顯高于對照組(0.90±0.037),再比較輕度組(2.44±0.614)及重度組(4.42±1.059),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);⑤單因素方差分析顯示子癇前期患者胎盤組織中S100A8 mRNA水平明顯高于對照組(0.98±0.04),再比較輕度組(3.83±0.879)及重度組(7.59±1.

5、803),差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);⑥子癇前期患者血漿中Gelsolin水平與胎盤組織中Gelsolin mRNA的表達水平無相關性(r=0.163,P>0.05);⑦子癇前期患者血漿中S100A8水平與胎盤組織中S100A8 mRNA的表達水平呈正相關(r=0.701,P<0.01)。
  結論 iTRAQ聯(lián)合LC-MS/MS技術能夠有效地篩選出子癇前期血漿差異蛋白。Gelsolin和S100A8的差異表達與子癇前期的發(fā)

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