1、目的：
　　 周圍神經(jīng)損傷后，靶源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(NTFS)無法通過逆向運輸?shù)竭_神經(jīng)元，神經(jīng)元會因缺少或喪失這些物質的支持而發(fā)生凋亡，特別是出現(xiàn)在運動神經(jīng)元。以往的研究著重于選擇有效的移植物，改善損傷微環(huán)境，以及靶組織分泌的神經(jīng)因子對神經(jīng)再生的趨化性和營養(yǎng)性等，而缺少移植物對相應神經(jīng)元保護作用機制的研究。脫細胞神經(jīng)移植物作為有生物活性的神經(jīng)替代物，具有良好的仿生性和組織相容性，移植后為軸突再生提供適宜的微環(huán)境，能夠有效促進神經(jīng)再

2、生。Bcl-2基因家族是迄今為止研究得最為深入和廣泛的凋亡調控基因之一。其中Bcl-2和Bax分別是主要的抗凋亡和促凋亡成員，它們通過調節(jié)線粒體的功能來調節(jié)凋亡。本實驗建立脫細胞神經(jīng)移植物修復坐骨神經(jīng)缺損模型，通過免疫組織化學染色和Western Blot檢測凋亡指標Bcl-2、Bax在相應脊髓節(jié)段的表達，在基因和蛋白水平研究脫細胞神經(jīng)移植物對脊髓前角運動神經(jīng)元的保護作用。
　　 材料和方法：
　　 1、化學萃取脫細胞方

3、法制備脫細胞神經(jīng)移植物
　　 選用Wistar大鼠10只，經(jīng)過麻醉后取出雙側坐骨神經(jīng)，采用化學萃取方法制備脫細胞神經(jīng)移植物。制備的脫細胞大鼠坐骨神經(jīng)置入含100μg/ml慶大霉素和100μg/ml鏈霉素的PBS(PH7.4)液中，4℃下保存?zhèn)溆谩?br>　　 2、實驗動物和分組
　　 成年健康Wistar大鼠30只，體重200～250g，由中國醫(yī)科大學實驗動物部提供。隨機分為三組，每組10只，正常組，實驗組（脫細胞神經(jīng)

4、移植物橋接坐骨神經(jīng)缺損組），對照組（坐骨神經(jīng)缺損組）。
　　 3、取材和檢測
　　 動物飼養(yǎng)1個月后，取各組相應節(jié)段脊髓（L4-L6節(jié)段），進行免疫組織化學染色和Western Blot檢測Bcl-2、Bax在脊髓前角運動神經(jīng)元內的表達。
　　 實驗結果：
　　 1、術后大鼠手術側后肢無法運動，拖地行走，并且出現(xiàn)足部皮膚紅腫或不同程度的潰瘍。術后1個月，各組大鼠手術側足部皮膚紅腫及潰瘍基本消退，實驗組大鼠

5、術側后蹬有力，足趾稍能分開，步態(tài)趨于正常，對照組大鼠運動功能未見恢復。
　　 2、Bcl-2、Bax的免疫組織化學染色結果顯示：Bcl-2、Bax陽性表達均定位于細胞質內，呈棕黃色。正常組偶見Bcl-2、Bax陽性細胞，實驗組的Bcl-2陽性細胞略多于對照組，而實驗組的Bax陽性細胞卻少于對照組。
　　 3、Western Blot結果顯示：對照組Bcl-2較正常組表達減少，而實驗組Bcl-2表達明顯增多；正常組Bax幾

6、乎不表達，對照組表達明顯增多，而實驗組Bax表達減少。通過取Bcl-2/Bax的比值后結果顯示，對照組較正常組明顯下降(P＜0.05)，實驗組較對照組明顯升高(P＜0.05)。
　　 結論：
　　 1、大鼠坐骨神經(jīng)缺損后相應脊髓節(jié)段（L4-L6）內存在神經(jīng)細胞的凋亡，Bcl-2和Bax的陽性表達是神經(jīng)凋亡的重要指標
　　 2、應用脫細胞神經(jīng)移植物修復坐骨神經(jīng)缺損，可以通過影響B(tài)cl-2、Bax基因的表達，增加Bc